대장균에서 Hsp17.7 단백질 발현 확인을 위한 Western blot 및 ELISA 비교 분석

1. 서론

대장균에서 열충격 단백질 Hsp17.7의 발현량을 정확하게 측정하는 것은 세포 스트레스 반응 및 세포 보호 기전 연구에 매우 중요하다. Hsp17.7은 다양한 환경 스트레스에 대한 반응으로 발현이 증가하며, 세포 생존에 필수적인 역할을 수행하는 것으로 알려져 있다. 특히 대장균은 유전자 조작이 용이하고 배양이 간편하여 Hsp17.7 연구에 이상적인 모델 시스템으로 활용된다. 본 연구는 대장균을 이용하여 Hsp17.7 단백질 발현을 유도하고, Western blot과 ELISA라는 두 가지 정량 분석법을 비교 분석하여 각 방법의 장단점을 파악하고, Hsp17.7 연구에 최적의 방법을 제시하고자 한다. 이러한 연구 결과는 Hsp17.7의 기능에 대한 이해를 높이고, 향후 관련 질병 치료제 개발에 기여할 수 있을 것으로 기대된다.

대장균 BL21(DE3) 균주에 Hsp17.7 유전자를 도입하여 재조합 대장균을 제작했다. 균주는 37도에서 LB 배지에 배양하였으며, 배양액의 흡광도(OD600)가 0.6에 도달했을 때 1mM IPTG를 첨가하여 Hsp17.7 단백질 발현을 유도했다. IPTG 유도 후 4시간 동안 추가 배양을 진행하였다. 배양 후 원심분리하여 수확한 대장균으로부터 Bacterial Prote…