SDS-PAGE 이론

1. SDS-PAGE 개요

SDS-PAGE는 Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis의 약자로, 친수성 계면활성제인 SDS와 폴리아크릴아마이드를 이용하여 단백질의 크기를 분석하는 방법이다. 이 기술은 1970년대 후반에 개발되어 분자생물학 및 생화학 분야에서 널리 사용되고 있으며, 단백질의 순도 확인, 분리, 정량 등에 적합하다. SDS는 음전하를 띠는 강력한 계면활성제로, 단백질의 3차원 구조를 변성시켜 선형적인 폴ypeptide 사슬로 만들어 주며, 이로써 단백질의 전하와 크기만을 통제하게 된다. 결과적으로 단백질의 전하 대 질량 비율이 일정하게 되어, 전기영동 과정에서 크기만이 분리 기준이 된다. 애초에 단백질 샘플은 버퍼와 SDS 혼합액에 처리되어 일정한 음전하를 띠게 되며, 이후 폴리아크릴아마이드 겔 내에서 전기영동을 실시한다. 폴리아크릴아마이드 겔은 네트워크 형태로 만들어져 있어, 작은 크기의 단백질은 빠르게 이동하고 큰 크기의 단백질은 느리게 이동하게 된다. 일반적으로 5~20% 농도의 겔이 사용되며, 농도가 높을수록 작은 분자의 분리가 더 정밀해진다. SDS-PAGE는 단백질의 크기를 근거로 분리하는 만큼, 분리 후 감마선 …