본문/내용
1. PCR의 원리
폴리머레 길합반응(PCR, Polymerase Chain Reaction)은 특정 DNA 서열을 선택적으로 증폭하는 분자생물학적 기술이다. 이 과정은 세 단계로 반복되며, 각각의 단계는 1~2분 내외로 진행된다. 먼저, 변성 단계에서 온도를 94~98도까지 올려 DNA 이중나선이 서로 분리된다. 이때 이온 농도와 pH는 DNA 안정성에 영향을 미치며, 대부분의 실험에서는 95도에서 30초에서 1분간 진행한다. 다음으로, 결합 단계인 어닐링(Annealing)에서는 온도를 50~65도 사이로 낮춰 프라이머가 목표 DNA 서열에 특이적으로 결합하도록 유도한다. 이 온도는 프라이머의 GC 함량과 길이에 따라 조절되며, 일반적으로 GC 함량이 높을수록 낮은 온도에서 안정적인 결합이 이뤄진다. 마지막으로, 신장 단계인 증폭(Extension) 단계에서는 DNA 폴리머레이스가 프라이머를 시작점으로 하여 새로운 DNA 가닥을 합성한다. 이때 온도는 72도에서 주로 진행되며, 이온 농도와 Mg2+ 농도는 폴리머레이스 활성을 결정짓는 중요한 요소이다. PCR은 매 회 반복 시 타겟 DNA 양이 기하급수적으로 증폭되어, 30회 반복 시 10억 배 이상의 증폭이 가능하다. 이 기술은 1983년 캐리 댄엘스에 의해 …