2-D 전기영동법을 이용한 단백질분리

1. 2-D 전기영동법 개요

2-D 전기영동법은 단백질을 분리하는 데 있어서 가장 정밀하고 널리 사용되는 실험기법 중 하나이다. 이 방법은 두 가지 상이한 특성을 이용하여 단백질을 분리하는데, 첫 번째 차원은 등전점 이온 교환 전기영동(IEF, Isoelectric Focusing)으로, 단백질이 pH 기울기 내에서 자신의 등전점(pI)에서 가장 잘 분리되도록 한다. 등전점은 단백질이 가진 아미노산의 성질에 따라 달라지며, 이 특성을 이용해 단백질을 pH를 조절한 겔상에서 위치시키는 것이다. 두 번째 차원은 SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)로, 이 방법은 단백질의 분자량에 따라 분리하는 데 최적화되어 있다. SDS는 단백질에 결합해 이들이 갖는 자연적 3차원 구조를 풀어내고, 음전하를 부여하여 분자량에 따라 작용하는 전기장을 통해 분리를 가능하게 만든다. 이 두 과정을 연속적으로 진행하는 것이 2-D 전기영동법이다. 2-D 전기영동법은 1975년 O`Farrell 등에 의해 처음 제시되어 생명과학 연구에서 매우 중요한 역할을 맡게 되었으며, 병리학적 조사, 단백질 프로파일링, 생체지표 분석 등 다양한 분야에서 활용된다. 세계적으로 2-…(생략)