Blotting technology

1.Western Blotting

Western Blotting은 단백질을 검출하고 정량하기 위한 강력한 분자 생물학 기술이다. 이 방법은 특정 단백질의 존재를 확인하고, 그 단백질의 양을 추정할 수 있도록 설계되어 있다. 이 기술은 1970년대 후반에 처음 개발되었으며, 그 후 생명과학 및 의학 연구 분야에서 널리 사용되고 있다. Western Blotting의 절차는 크게 몇 가지 단계로 나뉘어진다. 첫 번째 단계는 단백질의 분리이다. 이 단계에서는 샘플의 단백질을 전기 영동법을 사용해 겔 내에서 크기별로 분리한다. SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis)는 일반적으로 사용되는 방법으로, SDS라는 음전하를 가진 계면활성제가 단백질에 결합하여 단백질을 변성시키고 균일한 전하를 부여한다. 이로 인해 단백질은 그 크기에 따라 겔에서 이동하게 된다. 두 번째 단계는 단백질의 전이 과정이다. 분리된 단백질은 겔에서 메모리나이트(Membrane) 필터로 전이된다. 보통 PVDF(Polyvinylidene fluoride) 또는 질환지(니트로셀룰로오스)를 사용하며, 이 과정은 전기적 힘을 이용해 단백질을 겔에서 막으로 이동시킨다. 이 단계에서 단백질이 막에 고정되면, 다…