Bradford Assay

1. 실험방법

5 정도가 적당하다. 혼합 후에는 반응을 위해 약 5분에서 30분 정도 방치한다. 이 시간을 충분히 두어야 시약의 색상 변화가 일어나고, 이 색상의 변화를 통해 단백질의 농도를 추정할 수 있다. 시료가 투명도 있게 변하고, 파란색으로 변하게 된다. 이 색상의 강도는 단백질의 농도에 비례하며, 일반적으로 냉장 보관된 시약은 사용 전 따뜻한 상태로 균일하게 섞어주어야 한다. 반응이 완료되면, 분광광도계의 도움을 받아 특정 파장에서의 흡광도를 측정한다. Bradford Assay의 경우, 흡광도 측정은 일반적으로 595nm에서 이루어진다. 측정된 흡광도를 바탕으로, 사전에 준비한 표준곡선과 비교하여 샘플의 단백질 농도를 계산한다. 표준곡선은 일정 농도의 단백질 용액을 이용하여 생성되며, 각 농도에 대한 흡광도를 측정하여 직선 관계를 확인한다. 이 표준곡선을 사용하면 임의의 단백질 샘플의 단백질 농도를 쉽게 계산할 수 있다. 실험이 끝난 후에는 모든 시약과 시료를 적절하게 폐기하고, 실험에 사용된 모든 장비와 공간을 정리하여 다음 실험을 위한 준비를 한다. 이러한 절차를 통해 Bradford Assay를 효과적으로 진행할 수 있다.

2. Cooma…