Bradford법을 이용한 조단백질 정량시험

1. 목적 및 원리

Bradford법은 단백질 농도를 정량하기 위한 간편하고 신속한 분석 방법으로, 단백질의 존재를 정량적으로 평가하는 데 널리 사용된다. 이 방법은 코마씨 블루라는 염료를 이용하여 단백질과의 결합에 의해 색의 변화를 측정하는 원리에 기초하고 있다. 코마씨 블루는 단백질의 아미노산 잔기와 상호작용하여 염료의 구조가 변형되며, 이로 인해 색 강도가 변화하게 된다. 특별히, 코마씨 블루는 단백질 내의 특정 아미노산, 주로 아르기닌, 라이신, 히스티딘과 강하게 결합하는 경향이 있으며, 이 결합은 염료의 스펙트럼 특성을 변화시킨다. Bradford법의 원리는 단백질 농도에 비례하여 측정된 색의 변화가 발생한다는 점이다. 샘플에 코마씨 블루 염료를 혼합하게 되면, 염료는 단백질과 결합하여 염료의 흡광도가 증가한다. 이 변화는 일반적으로 595 nm 근처의 파장에서 측정되며, 이때의 흡광도는 단백질 농도와 선형적인 관계를 갖는다. 각 시료의 흡광도를 측정하여 표준 곡선을 작성하면, 이를 통해 미지의 단백질 농도를 정량화할 수 있다. Bradford법은 간단하고 빠르며, 다른 일반적인 단백질 정량 방법인 Lowry법이나 BCA법보다도 상대적으로…