Gene silencing - Western blot , CTCF knockdown

Ⅰ. Introduction 실험 원리

Gene silencing은 특정 유전자의 발현을 억제하는 기법으로, 다양한 생물학적 연구와 임상 응용에 필수적인 기술이다. 이러한 기법은 유전자 기능의 이해를 돕고, 질병의 메커니즘을 규명하는 데 중요한 역할을 한다. 최근에는 RNA 간섭(RNA interference, RNAi)이나 유전자 편집 기술(CRISPR/Cas 등을 통해 gene silencing이 광범위하게 이용되고 있다. 이 과정에서 흔히 사용되는 방법이 Western blotting이다. Western blotting은 단백질의 존재 및 발현 수준을 조사하기 위해 널리 사용되는 실험 기법으로, 샘플에서 단백질을 분리하고, 특정 항체로 탐지하는 방식이다. 일반적으로는 샘플을 겔 전기영동을 통해 크기에 따라 분리한 후, 나일론 또는 PVDF 막에 전이시키고, 특정 단백질에 대한1차 항체를 사용하여 탐지한다. 그 후, 2차 항체와 효소 또는 형광 물질을 이용하여 시각화함으로써 단백질의 발현 수준을 정량적으로 분석할 수 있다. 이를 통해, 특정 유전자의 발현이 억제되었는지 또는 변화가 있었는지를 확인할 수 있다. CTCF(CCCTC-binding factor)는 유전자 발현 조절 및 염색체 구조 유지에 중요한 역할을 하는 단백질이…