Genome engineering 기술 정리

1. PCR

PCR(Polymerase Chain Reaction)은 특정 DNA 서열을 선택적으로 증폭하는 데 사용되는 강력한 분자 생물학 기술이다. 1983년 키오 산다는 과학자에 의해 개발되었으며, 이 기술은 짧은 시간 안에 미량의 DNA를 수백만 배 증가시킬 수 있어 다양한 생명과학 분야에서 널리 활용되고 있다. PCR의 원리는 DNA의 이중 나선을 분리한 후, 특정 서열에 대한 프라이머(primer)를 결합시키고, DNA 중합효소를 이용해 해당 서열을 복제하는 과정을 반복하는 것이다. PCR 과정은 크게 세 단계로 나눌 수 있다. 첫째 단계는 변성(denaturation)이다. 이 단계에서 DNA 이중 나선이 고온(보통 94도에서 98도)으로 가열되어 두 개의 가닥으로 분리된다. 이로 인해 DNA의 이중 나선 구조가 풀리게 된다. 둘째 단계는 annealing이다. 변성 후, 온도를 낮추어(보통 50도에서 65도) 프라이머가 타겟 DNA 서열에 결합할 수 있도록 한다. 프라이머는 특정한 서열을 인식하여 결합했던 특정 DNA 서열의 양 끝에 위치하게 된다. 셋째 단계는 신장(extension)이다. 이 단계에서 DNA 중합효소(일반적으로 Taq polymerase가 사용됨)가 프라이머와 결합한 DNA 가닥을 따라 새로운 DNA 가닥을 …