MTT assay

Ⅰ. Introduction 실험 원리

MTT assay는 세포 생존성, 증식 및 독성을 평가하기 위해 널리 사용되는 색소환원 분석법이다. 이 방법은 비극성 부유 세포에서 특정한 효소에 의한 MTT의 환원이 기초가 된다. MTT는 노란색의 물질로, 세포 내에서 미토콘드리아의 NADH 또는 NADPH와 같은 전자 운반체에 의해 환원되면서 자주색의 포마잔 결정을 생성한다. 세포가 생존하고 활발하게 대사 활동을 하고 있다는 것은 이 환원 반응이 원활히 일어난다는 의미이며, 따라서 MTT assay는 세포의 생존성과 기능을 평가하는 중요한 실험으로 자리잡았다. MTT assay의 원리는 단순하지만 효과적이다. 실험 과정에서 MTT 시약을 세포 배양액에 첨가하면 세포 내부의 미토콘드리아에서 MTT가 환원되어 포마잔으로 전환된다. 일반적으로 포마잔 결정을 용해시키기 위해 특정 용매, 보통 DMSO(디메틸설폭사이드) 또는 이소프로판올을 사용한다. 포마잔이 용해되면 자주색 용액이 생성되며, 이 자주색의 농도는 세포의 생존율과 대사활동을 직접적으로 나타낸다. 자주색 용액의 세기는 분광광도계에서 특정 파장, 보통 570 nm에서 측정하여 정량화할 수 있다. 측정된 흡광도 값은 생존하는 …