Western Blot Analysis (면역 확인 분석)

1. Blotting(블러팅)

Blotting은 분자 생물학에서 단백질, 핵산 또는 기타 생체 분자를 검출하기 위해 고안된 기술이다. 이 기술은 특정 분자를 분리하고, 이 분자들이 어떤 특성을 가지고 있는지 분석하는 데 유용하다. Western blotting은 특히 단백질 분석에 사용되며, 이 과정은 여러 단계를 포함한다. 첫 번째 단계는 샘플 준비이다. 이 단계에서는 조직이나 세포에서 단백질을 추출하여 원하는 단백질을 농축시키는 과정이 포함된다. 이후 단백질은 SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)를 통해 분리된다. 이 과정에서 단백질은 크기와 전하에 따라 분리되며, 작은 단백질은 젤 안에서 더 빠르게 이동하고 큰 단백질은 이동 속도가 느려지게 된다. 단백질이 분리된 후에는 전이(transfer) 단계가 진행된다. 이 단계는 분리된 단백질을 니트로셀룰로오스 또는 PVDF(Polyvinylidene fluoride)와 같은 막으로 옮기는 과정이다. 이때 전기장을 이용하여 젤에서 막으로 단백질을 전이시키며, 이는 단백질이 막에 고정되고 이후의 검출 단계가 용이하게 하도록 한다. 전이 과정이 완료된 후에는 차단(blocking) 단계가 이어진다. 이 단계…