세균 샘플링 및 배양과 16s rDNA 분석에 관한 포항공대 화학공학 실험 보고서

1. 실험

이번 실험에서는 환경에서 세균을 샘플링하고 배양한 후, 16s rDNA 분석을 통해 세균의 유전자 정보를 확인하였다. 먼저, 샘플링을 위해 지정된 지역에서 토양 및 수질 샘플을 채취하였다. 채취한 샘플은 무균 상태에서 수집하여 오염을 방지하였다. 이후, 채취한 샘플을 배양하기 위해 Nutrient Agar와 같은 일반 배양 배지를 준비하였다. 각 샘플을 배지에 접종한 후, 37도에서 24시간 동안 배양하여 세균의 성장을 유도하였다. 배양 후, 배지에서 형성된 콜로니를 관찰하였으며, 다채로운 형태의 콜로니가 나타나는 것을 확인하였다. 이후, 특정 콜로니를 선택적으로 채취하여 추가 배양을 실시하였고, 이 과정에서 세균의 순수 배양을 위해 colony picking 기법을 활용하였다. 순수 배양된 세균은 후속 16s rDNA 분석을 위해 DNA를 추출하였고, 이 단계에서는 세균의 세포로부터 유전물질을 효과적으로 분리하기 위해 상용화된 DNA 추출 키트를 사용하였다. 추출한 DNA는 PCR 반응을 통해 16s rDNA 영역을 증폭시켰고, 증폭된 DNA는 젤 전기영동을 통해 크기를 확인하였다. 이후, Sanger 시퀀싱을 통해 16s rDNA 서열을 해독하였고, 이를 바탕으로 BLAST 검색…