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바이러스학 실험 결과보고서 Cell harvest & Protein sampling
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바이러스학 결과 Cell harvest & Protein sa.hwp
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자료설명
바이러스학 실험 결과보고서로 Cell harvest & Protein sampling 실험에 대한 결과 보고서입니다.
Cell harvest & Protein sampling 실험은poliovirus에 감염된 BGM cell을 용해시킨 후, 단백질을 추출하고 정량하는 실험입니다. 단백질을 추출하는 이유는 SDS-PAGE를 해서 크기에 따라 단백질을 분리
Cell harvest & Protein sampling 실험은poliovirus에 감염된 BGM cell을 용해시킨 후, 단백질을 추출하고 정량하는 실험입니다. 단백질을 추출하는 이유는 SDS-PAGE를 해서 크기에 따라 단백질을 분리
목차/차례
- 1. Title
- 2. Objective
- 3. Method
- 1) Cell harvest
- 2) Protein sampling
- 4. Result
- 5. Discussion
- 1) SDS(sodium dodecy sulfate)
- 2) lysis buffer
- 3) Bradford 시약
- 6. References
본문/내용
1. Title : Cell harvest & Protein sampling
2. Objective : 크기에 따라 단백질을 분리하는 SDS-PAGE를 하기위해서 poliovirus에 감염된 BGM cell을 용해시킨 후, 단백질을 추출하고 정량한다.
3. Method
1) Cell harvest
① 배지를 e-tube에 수거한다.
② PBS로 washing 하고 1ml PBS를 추가한다.
③ Scraper로 긁어 모아 e-tube에 담는다.
④ 5,000rpm/5min centrifugation
⑤ 상등액을 suction해서 pellet을 취한다.
2) Protein sampling
① Pellet에 lysis buffer를 넣는다.
② Voltexing하여 pellet을 살짝 풀어준 후 deep freezer (-80℃)에 15분간 넣어둔다.
③ 37℃ water bath에 살짝 녹인 후 centrifugation (13,000rpm, 15min, 4℃)
④ 상등액을 새로운 e-tube에 옮긴다.
⑤ O.D값을 측정한다.
(중략)
5. Discussion
이번 실험으로는 BGM cell을 sub cultre하고 seeding 한 후 virus를 감염시킨 BGM cell을 수거하여서 Cell harvest 후 Protein sampling을 통해 단백질을 추출하고 정량했다.
먼저 Cell harvest로 배지를 e-tube에 수거한다. PBS 1.5ml씩 넣어 washing 하고 1ml PBS를 추가한다. 배지의 단백질을 제거…
2. Objective : 크기에 따라 단백질을 분리하는 SDS-PAGE를 하기위해서 poliovirus에 감염된 BGM cell을 용해시킨 후, 단백질을 추출하고 정량한다.
3. Method
1) Cell harvest
① 배지를 e-tube에 수거한다.
② PBS로 washing 하고 1ml PBS를 추가한다.
③ Scraper로 긁어 모아 e-tube에 담는다.
④ 5,000rpm/5min centrifugation
⑤ 상등액을 suction해서 pellet을 취한다.
2) Protein sampling
① Pellet에 lysis buffer를 넣는다.
② Voltexing하여 pellet을 살짝 풀어준 후 deep freezer (-80℃)에 15분간 넣어둔다.
③ 37℃ water bath에 살짝 녹인 후 centrifugation (13,000rpm, 15min, 4℃)
④ 상등액을 새로운 e-tube에 옮긴다.
⑤ O.D값을 측정한다.
(중략)
5. Discussion
이번 실험으로는 BGM cell을 sub cultre하고 seeding 한 후 virus를 감염시킨 BGM cell을 수거하여서 Cell harvest 후 Protein sampling을 통해 단백질을 추출하고 정량했다.
먼저 Cell harvest로 배지를 e-tube에 수거한다. PBS 1.5ml씩 넣어 washing 하고 1ml PBS를 추가한다. 배지의 단백질을 제거…
참고문헌
남상욱 외 2인/ 유전공학의 이해/ 라이프 사이언스/ p. 192
https://bio-chae.com/ripa-lysis-buffer/
https://bio-chae.com/ripa-lysis-buffer/
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I D : khg0*** Date : 2023-01-05 FileNo : 23010503 |
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