7. 단백질 SDS-PAGE, 에이쁠 보고서

1. 실험도구 및 재료 : 액체배지, 1M IPTG, SDS 시료 완충액, 3’ D.W (3차 증류수), 1.5ml microcentrifuge tube, 얼음, 얼음 대야, 알코올램프, 라이터, 네이펜, 탁상 원심분리기, 37℃ 회전 배양기, heat block, cell stock tube, 피펫 & 피펫팁, 검증된 재조합 DNA로 형질전환된 적격세포 (E.coli R2(DE3) pLysS)

2. 실험원리 : 이 실험에서 사용되는 단백질 발현계는 세 가지 구조들로 이루어져 있다. ① IPTG로 인하여 발현이 촉진되는 T7 RNA 중합효소 (polymerase)에 대한 정보를 게놈 상에 ‘DE3’라는 이름의 구조로 저장하고 있는 박테리아, ② T7 RNA 중합효소에 대한 저해제인 T7 lysozyme를 발현하는 pLysS라는 플라스미드, ③ IPTG에 의해 촉진되며 T7 RNA 중합효소를 통해 이루어지는 삽입체 유전자에 대한 전사를 수행하는 pET 플라스미드이다.