분자생물학

9 .DNA transfer 방법에 대해 설명하시오.
1) 모세관 현상을 이용한 이동(Capillary transfer)

흔히 Southern blot 혹은 Southern hybridization 이라 불리우는 방법으로 Southern(1975)에 의해 고안되었다. Agarose gel 내에서 크기별로 분류된 DNA 조각들이 모세관 현상에 의한 용액의 흐름을 타고 유출되어 solid support의 표면에 축적되도록 하는 방법이다. 모세관 현상은 다음 그림에서와 같이 여러겹의 종이 흡수지를 타고 용액이 흐르게 되어 형성되게 된다.
이때 DNA의 이동효율은 DNA 조각의 크기와 agarose gel의 농도에 따라 변하게 된다. 1 kb 이하의 작은 크기의 DNA는 0.7% gel로부터 약 1시간 이내에 쉽게 이동된다. 그러나 더 큰 크기의 DNA의 이동은 이동속도가 늦고 그 효율도 떨어지게 된다. 예를 들어 15 kb 이상의 DNA를 모세관 현상을 이용하여 이동시키기 위해서는 18시간 이상의 시간이 필요하며 그나마 완전히 이루어지지는 않는다. 이런 큰 크기의 DNA 이동은 gel이 탈수되기 전에 얼마나 gel로부터 유출되느냐에 따라 결정되는데, 그것은 이동 과정중에 용액이 reservoir로부터 흐르기도 하지만 gel 자체에 있던 용액이 흘러나와 탈수되면…(생략)