[실험] Gel Filtration을 이용한 molecular weight 결정

1. 실험제목 : Gel Filtration을 이용한 molecular weight 결정

2. 실험날짜 : 2004년 10월 16일 토요일

3. 제출자 및 공동 실험자

4. 목적
☞ 혼합물을 각 분자의 크기가 다른 성질을 이용한 gel filtration chromatography를 사용해서 분리한다.

5. 원리
분자의 크기가 다른 혼합물을 겔 입자층에 통과시키면 큰 분자는 빨리 통과하지만 작 은 분자는 느리게 통과한다. 겔 거르기 크로마토그래피는 이 원리를 이용하여 물질을 분 리하는 방법이다. 분자량이 다른 혼합물을 채운 column위에 충진시키면, 분자량이 큰 물 질은 겔의 입자 사이를 빠져나가고 분자량이 작은 물질들은 겔의 입자 내부에 있는 동공 에 들어갈 수 있으므로 column을 느리게 통과하게 된다. 이러한 분리과정을 분자체 (molecular sieve)라고 하며, stationary phase(정지상)는 겔의 입자이고, mobile phase (이동상)는 solvent이다.
겔 거르기 크로마토그래피에서는 이동상의 부피()를 틈새 부피(void volume) 라고 한다. 다음과 같은 관계식을 유도하면

는 머무른 부피, 는 정지상의 부피이며, 는 분배계수[=(정지상에서 용질의 농 도)/(이동상에…