조단백질 함량 분석

4) 정량 조작법

정량 조작법에는 시료의 분해, 분해액의 수증기 증류 및 암모니아(NH3)의 포집, 규정 알칼리 용액(NaOH 용액)으로 적정 등의 3단계로 크게 구분된다.



① 분 해

잘 건조된 분해 플라스크에 적당량의 시료(질소량 10～25mg, 단백질 함량 50～150mg 상당)를 정확히 취하여 넣는다. 시료와 분해 촉매는 분해병의 긴목에 묻지 않도록 폴리에틸렌 필름이나 질소를 함유치 않은 종이(여과지, 약포지 등)에 싸서 넣으면 좋다. 액체 시료는 소량의 물로 씻어 넣는다. 다음으로 진한 황산 약 20ml를 넣고 촉매 1～3g을 첨가하여 가볍게 분해병을 흔들어 시료와 황산을 잘 혼합시키고 분해대에 비스듬히 고정 시켜서 draft 내에서 분해를 시작한다. 분해가 시작되면 액이 검게 되고 거품이 부글부글 끓어오르는 경우가 많다. 이 때는 가열을 약하게 하고 이어 검은색의 점도가 큰 액체가 되면 온도를 높여 끊인다. 반응물의 색상이 흑갈색에서 다갈색으로 마지막에는 청색～황록색의 투명한 액이 된다. 이 때부터 1시간 더 가열하여 분해를 완결시킨다. 이 시간이 너무 짧으면 방랭 중에 다시 흐려지는 경우가 있다. 보통 분해 시간은 길어서 4～6…