쌀에 대한 영양학적인 분석

형질전환 시키기 위해서는 2개의 plasmid를 만들어서 microinjectile bombardment를 이용하여 endosperm에 끼워 넣었다. 하나는 pCPsyH로, daffodil phytoene synt㏊se cDNA와 CaMV 35S promoter를 사용한 것과 다른 하나는 pGt1PsyH인데, 이것은 Glutelin promoter와 daffodil phytoene synt㏊se cDNA를 사용한 것이다. CaMV 35S promoter의 경우는 constitutive하게 모든 tissue에서 발현이 될 수가 있으며 Gt1 promoter의 경우에는 rice-endosperm에만 specific하게 발현하는 특성이 있다. 두 plasmid 모두 CaMV 35S/aphⅣ로 된 casette를 만들어 끼워넣어 hygromycin resistance의 유무에 따라 형질전환이 되었는지를 알 수가 있고 안정하게 하는 효과를 낼 수가 있으며 벼는 Japonica종인 Taipei309를 써서 형질전환을 시켰다. 이렇게 형질전환이 된 embryo를 hygromycin B가 포함된 medium에서 키우면 잘 자라게 되고, 이것이 줄기와 뿌리가 충분히 자라게 되면 흙에다 옮겨 키우게 된다. 이 식믈을 R0라고 명칭하고 이렇게 형질전환시킨 psy gene이 endosperm에 몇 copy가 들어갔는지 알아보기 위해 southern blot을 해본다. 이 때 Gt1 promoter를 사용해 형질전환을 …