제한효소의 특성

이와 같은 제한효소에 의한 DNA분자 내의 절단부위를 찾아내서 그림으로 표시해 놓은 것은 제한지도라고 한다. 제한지도를 작성하는 방법은 다음과 같다. 첫째, 선상 DNA와 원형DNA분자를 제한효소로 가수분해한 후 가수분해 산물을 전기영동 시켜 나타난 밴들의 양상을 비교 검토하여 작성한다. 원형DNA분자의 전기영동 밴드 중에는 선상DNA분자의 양끝에 해당하는 절편의 밴드는 없고, 선상의 양끝 절편이 합쳐져서 이루어진 하나의 새로운 DNA절편의 전기영동 밴드 양상에서는 나타나지 않는 두 밴드를 이루는 것들이다. 그리고 선상 DNA분자내의 각 DNA절편의 서열은 다음과 같이 정한다. 즉, 선산DNA재료를 둘로 나누어 하나는 특정 제한효소로 완전 가수분해시키고 다른 것은 부분적으로 가수분해시킨 다음, 각각 전시영동 시키면 밴드가 나타나는데, 이들 각 밴드내의 DNA절편의 분자량을 측정한다. 그런데 완전 가수분해 시에는 나타나지 않으나 부분적 가수분해 시에는 나타날 뿐만 아니라 가수분해시간을 단축시킴에 따라서 더욱더 뚜렷하게 나타나는 밴드가 있다.