수용성 단백질 정량 - Bradford Method

※ 실험 과정 수정) (5) 과정에서 pH7.0 인산버퍼를 첨가하기 전에 침전물의 색깔이 녹색이었다. 이는 침전물에 아직 많은 불순물들이 있다는 것을 의미하므로, 다시 (1)과정으로 돌아가서 단백질을 녹이는 pH7.0 인산버퍼로 단백질을 녹였다. 다음으로 3000g로 10분간 원심분리를 했다. → 상등액 속에는 단백질이 포함되어있다. 그다음 상등액을 TCA로 녹이는 과정을 재차하였고, 다시 원심분리하여 보다 순도높은 단백질 침전물을 얻게 되었다. ⇒ 그 이후로 (6), (7) 과정을 진행시켰다. 3. Results (1) 파장 595nm 빛에서의 흡광도는 0.161 이 나왔다. (2) Standard Curve에 의한 단백질 함량을 계산해보면, Protein() = 2430.6 × 0.161 - 278.45 = 112.8766 우리는 실험 과정 (6)에서 5ml의 인산버퍼에 희석된 시료의 0.1ml를 취해서 양을 측정했다. 따라서 시금치 1g중 단백질의 전체양을 계산해보면, 112.8766 × 50 = 5643.83= 5.64383 ≒ 5.64 mg 이 된다.