생화학 실험

1.실험제목
Preparation of competent E-coli & Transformation

2.실험목적
DNA가 유전적 형질 전환을 한다는 것을 알아보기 위해서 Competent된 E-coli를 만든 후 transformation을 시킨다.

3.기구 및 시약
overnight cultured BL21 Ligated DNA, centrifuge tube, centrifuge mechine, test tube for culture, balance ice box, 0.1M CaCl2, micropipet & tips, microtube heating block, timer, autoclaved LB medium, ampicilin stock, LB-agar solution, petri pish, alcohol lamp, 소독용 alcohol, glass road

4.이론
1) 유전자 조작원리(유전자 cloning의 한 방법)
유전자 cloning의 한 방법은 유전자를 포함하고 있는 DNA 절편을 plasmid vector에 삽입하는 것이다. 삽입된 유전자는 plasmid가 복제될 때 함께 복제되며 세포내에 일정 수 존재하는 재조합된 plasmid vector를 분리함으로써 원하는 유전자를 보존하고 유지할 수 있다. 이와 같이 유전자는 다양한 vector에 삽입하여 염기서열의 결정, 돌연변이의 도입, 대장균 내에서의 단백질 과량발현 등 여러 조작이 가능하게 된다.
유전자 cloning에 사용되는 plasmid vector는 기본적으로 복제…