원심분리법

1. 실험제목: 원심분리법 2. 실험목적: 원심분리법을 이용해 rat의 각 세포소기관을 분리해보고 각 세포소기관별 분포정도를 이해하고, 분광광도계를 이용하여 흡광도를 측정해서 각 소기관의 단백질 농도를 구해본다. 3. 서론 (1) 상대원심력 (relative centrifugal force; RCF) ① 원심분리 일정한 각속도를 유지하며 원운동을 하는 물질은 밖으로 향하는 원심력(F)을 받고 있음을 이용한다. ② 원심력(F) 운동하는 물질의 질량(m), 각속도(w), 회전반지름(r)에 의해 결정된다. ③ 상대원심력(RCF) 원심력이 지구의 중력(mg)에 대한 비율로 표시될 때의 그 비율을 말한다. 실제 원심분리 시, 1분간의 회전수(rpm)를 알면 각속도(w)의 값을 얻을 수 있고 RCF값을 rpm과 r로 표시가 가능하다. 고정각 회전자(fixed angle rotor)의 경우처럼 반지름(r)의 값이 회전자의 부위에 따라 다르기 때문에 RCF의 값이 부위에 따라 많은 차이가 난다. → 한 회전자(rotor)내의 샘플이 갖는 RCF값은 평균 RCF값으로 표시한다. (2) 침강이론 (sedimentation theory) 어떤 입자가 진공상태가 아닌 특정용매에 들어있는 경우, 원심력장에서 입자에 작용하는 순수원심력은 용매 내에 있으면 부력으로 인해 입자에 작용하는 원심력이만큼 감소한다. (=용액의 밀도, =입자의 부피) 또한 순수원심력에 의해 용매 내에서 이동하는 입자는 같은 정도의 마찰력을 받게 된다. 이때 마찰력은 마찰계수()와 입자의 침강속도()의 곱으로 나타낸다. →