주사전자현미경

** 동결건조법 **

-소개
전자현미경에서 표본 건조에 동결건조방법은 오래 전부터 널리 사용되는 건조법으로 표본의 수축이 적고 화학적 탈수과정에서 발생할 수 있는 세포내의 성분이 추출되는 것을 최소화할 수 있는 장점이 있다. 또한 엑스선에 의한 세포내의 미소원소(elements)를 검출(energy dispersive x-ray spectrum, EDS)하는 과정에서는 필수적이다.

-원리
일반적으로 생체표본을 탈수하는 과정에서 최종단계로 액체 상태에서 기화되는 과정이 있는데 액체는 기화하는 과정에서 표면장력이 발생하여 관찰하려는 표면(surface)이 심하게 변화하게 된다. 이때 고체 상태에서 기화하는 상태의 환경을 만들면 표면장력이 없어지는 현상을 이용한 것이 동결건조법이다. 즉, 표본을 급속히 동결시키며 고 진공(high vacuum)상태의 환경을 만들면 표면장력이 발생하지 않으며 건조되는 방법이다. 일반적으로 생물표본은 -130 ℃ 이상에서는 얼음 결정이 커지는 문제점이 있으나 이때의 진공은 7.6X10-9 Torr 가 되어야한다. 그러나 이러한 고 진공을 만들기는 어려움이 많다. 이때 -60℃~-70 ℃ 정도이면 어느 정도 가능하다. 그러나 -20 ℃~-30 ℃ 에서는 형태…(생략)