항원-항체 반응에 관하여

2. ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) ELISA는 항원 또는 항체를 검출할 때 radioimmunoassay와 비교될 만큼 매우 민감한 방법으로 10pg이하의 단백질도 검출할 수 있다. ELISA 방법에는 간접법 및 sandwich법 두 가지 방법이 많이 사용되고 있다. 간접법은 수용성 항원 또는 세포를 우선 solid phase인 평판구멍(plate well)에 부착시킨 다음 이들에 특이한 1차 항체, 그리고 1차 항체에 특이한 효소가 표지된 2차 항체(alkaline phosphatase 또는 peroxidase)를 순차적으로 반응시키고 상기한 효소에 대한 기질을 첨가했을 때 나타나는 색깔로 항원에 대한 특이 항체의 존재를 확인하는 방법이다. sandwich법은 극소량의 항원의 존재를 확인하고자 할 때 이 항원에 특이한 항체(1차 항체)를 평판구멍에 먼저 부착시키고 다음에 항원, 항원에 대한 또 다른 특이항체(2차 항체), 그리고 2차 항체와 반응할 수 있는 효소로 표지된 항체(3차 항체)를 차례로 반응시키어 항원을 검출하는 방법이다. 이 방법으로 항원의 양을 정량할 수 있다. 3. 침강법 1) 중층법 *시험방법 크기가 같은 소시험관을 병렬하고 모세피펫으로 준비된 혈청 0.1ml씩 분주하고 최후의 한 개는 대조군으로 생리식염수 0.1ml을 넣어둔다. 별도로 소시험관에 침강원을 계단식으로 희석한 것을 모세피펫으로 각 0.1ml씩 조용히 넣는다. 실온에서 15분, 30분, 1시간, 2시간 후 중층 사이에 윤상이 생기면 양성으로 판정한다. 2) 모세관법 이 방법은 연쇄구균의 군형의 결정 등에 이용되며, 항혈청 등 재료가 절약되고 한번에 많은 항원의 침강반응을 판정할 수 있어서 이용범위가 넓다. *시험방법 직경 1mm, 길이 5-10cm의 모세그라스관을 멸균하여 둔다. 이 모세관을 항혈청액에 넣어 항혈청액이 모세관의 1/3가량 상승하였을 때 다른 끝을 손가락으로 막고 다른 끝을 여과지…
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