다. Amino Acid의 Titration과 pH buffer 작용
Amino Acid를 NaOH와 같은 염기로 Titration을 하여 얻어지는 Titration Curve는 적정하는 Amino Acid의 pH buffer 작용을 잘 설명해 준다.
즉 Amino Acid의 Carboxyl기는 Weak Acid이므로 NaOH-와 같은 Strong Base와 반응하면 일정한 pH 범위 내에서 큰 pH 변화를 일으키지 않는 pH Buffer 작용을 한다는 것이다.
그림 4 는 0.1 M alanine을 0.1 M NaOH로 적정한 Titration Curve이다. 적정의 초기에서는 대부분의 Alanine은 완전히 Protonated된 상태, 즉 +NH3-CHR-COOH의 상태로 존재한다. 그러나 첫번째의 buffering Point에서는 Alanine은 +NH3-CHR-COOH의 상태와 +NH3-CHR-COO-의 상태로 동시에 존재하며 pK1 지점은 이 두가지 Alanine form의 양이 동일한 지점, 즉 pH = pK1인 지점을 의미하며 Alanine의 Carboxyl 기의 pK`는 이 때의 pH 값인 2.34이다.
염기인 NaOH가 Alanine과 동량이 첨가된 지점인 pH = 6.01 지점은 모든 Carboxyl기가 Deprotonated되고 +NH3-CHR-COO- 의 상태로 존재하는 지점이다.
이 pH에서 모든 Alanine 분자들은 동일한 +, - charge를 지니기 때문에 전기적으로 중성이다. 이렇게 Amino Acid 분자들이 전기적으로 중성이 중성인 지점을 등전점 (Isoelectric Point)이라 하며 등전점은 Amino Acid 의 종류에 따라 틀려지게 된다.
pH가 등전점보다 높은 수치에 이르게 되면 NH2-CHR-COO- 상태의 Alanine이 생성되게 되며 이때 두번째의 buffering pH Region에 도달하게 된다. pH = 9.69 지점은 +NH3-CHR-COO- 와 NH2-CHR-COO- 의 …(생략)
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