콜레스테롤실험

2. MATERIAL Tip, Pippet, Test tube, spectro-20, D.W, 비커, Centrifuge, Fecl3, H2SO4, Ethylacetate ethanol, 삼각플리스크, Tritonx-100, cleanbanch 3. METHOD 1. 혈액을 상온에서 응고될때까지 기다린 후 냉장고에서 냉각 2. 약 3000rpm 5min가 원심 분리 3. sup만 따로 모은다. (1) cholesterol standard curve 작성 a. 표준용액(1mg/ml) 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 ethylacetate -etanol(ml) 4.5 4 3.5 3.0 2.5 썩어 3000rpm 5min 원심분리 b. sup. 0.5ml + Fecl3 1ml + H2SO4 1ml을 섞는다. c. A550에서 흡광도 측정 d. standard curve 작성 (2) cholesterol 총량 a. 혈청 0.5ml + ethylacetate ethanol 5ml를 섞는다. b. 3000rpm, 5분 원심분리 c. sup. 0.5ml + Fecl3 1ml + H2SO4 1ml을 섞는다. (3) free cholesterol 양 측정 a. (2) 추출액 0.6ml + Tritonx-100 2ml을 섞는다. b. 10분간 상온에서 incubation c. 3000rpm 5min centrifuge d. pptf,f 1ml acetone 1회 washinl e. acetone 완전히 제거후 ethylacetate 0.3ml + Fecl3 1ml + H2SO4 1ml을 섞는다. f. A550에서 흡광도 측정 g. 양 측정 4. RESULT 3. (1) c x축 표준용액(1mg/1ml) 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 y축 (흡광도) 0.1 0.43 0.6 0.85 ∞ (2) d. 흡광도 = 0.08 e. cholesterol …
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