본문/내용
생물학적 연구가 까다로운 척추동물의 신경계에 비해 비교적 단순한 구조를 갖고 있는 무척추 동물의 신경계는 그 단순성 이외에도 생물학적 연구를 용이하게 해주는 많은 장점이 있다. 특히 해양 달팽이의 한 종인 군소(Aplysia)의 예를 보면, 첫째, 뉴런의 숫자가 20,000개 정도 밖에 안되며, 둘째 행동이 단순하기 때문에 이에 관련된 신경회로의 분석이 용이하며, 셋째 뉴런의 크기가 다른 세포에 비해 매우 크므로 여러 생물학적 기술을 적용하기에 용이하다. 따라서 그 동안 학습과 기억에 대한 생물학적 연구에 군소를 포함한 무척추 동물들이 주로 사용되어 왔다. 본 실험에서는 군소를 직접 해부하여 신경절을 관찰하고 신경절을 분리하여 단일 뉴런을 분리, 관찰하고자 한다.
재료 및 시약
군소
해부판, 해부기, 미세 가위, 미세 forceps, dish, sylgard plate, insect pins, 해부현미경, Water bath
0.38 M MgCl2, 1 % Protease, ASW, L15 media
실험방법
1. 군소 체중의 1/2 만큼의 0.38 M MgCl2를 주사하여 마취시킨다.
2. 해부하여 내부 기관 및 신경절의 분포를 관찰한다.
3. 신경절을 분리한다.
4. 해부현미경 하에서 trimming 한다.
5. Abdominal ganglion을 34℃ 에서 1시간 - 1시간 30분간 protease 처리한다.
6. Disheathing하여 신경세포들을 노출시킨다.
7. Electrode을 이용하여 단일 신경세포를 분리해 내어 관찰한다.
참고문헌
Kandel E. R. et al., Essentials of neural...
Kandel E. R. et al. Principles of Neural Science (4th ed.). 1999. Elsevier.
Kandel E. R. Cellular Basis of Behavior, 1976. W.H. Freeman and company.
Hille B. Ionic channels of Excitable membranes (2nd ed.) 1992. Sinauer Associates Inc.
Kingsley R. E., Concise of text of Neuroscience, 1996, Williams & Wilkins