본문/내용
이에는 미세조작장비 및 핵이식기법 자체의 개발에 의한 효율성 향상을, 생물학적으로는 공여핵 세포의 재프로그래밍현상 및 난자의 발육능 획득에 대한 이해를 추구하는 방향에서 접근이 이뤄지고 있다. 최근에는 형질전환동물의 생산효율을 증진시키기 위한 방법의 수단으로 핵이식 기법이 각광을 받고 있으며 이를 의학에 적용하기 위한 기초연구가 광범위하게 추진되고 있다.
2. 수핵난자의 준비
수핵난자의 탈핵은 핵이식과정 중 가장 먼저 행하게 되며 cytoskeletal inhibitor인 cytochalasin B를 처리하여 세포막의 파괴를 제어한 상태에서 미세조작을 통해 이루어진다. 수핵난자로는 소, 양 등에서는 MII(metaphase II)가, 설치류에서는 1-2세포기의 수정란이 사용되었으나 마우스에서 MII기의 난자를 이용한 복제동물의 성공(Wakayama et al, 1998) 이후로는 MII 기의 난자가 보편적으로 이용되고 있다. 소의 경우는 체외성숙과정이 보편화되어 있기 때문에 현재에는 체외성숙난자를 이용하고 있으나 돼지는 현재까지 체외성숙난자의 발육능이 저조한 점 등의 이유로 체내성숙난자가 이용된다. MII기의 난자를 수핵란으로 하여 제1극체 주위 세포질 중 15-40%…
참고문헌
◦ Betts DH, Bordignon V, Smith L, Semple E, King WA. Telomerase activity in bovine blastocysts, fetal fibroblast and stem cell-like cell lines cultured under various conditions. Theriogenology, 51:181, 1999.
◦ Cibelli JB, Stice SL, Golueke PJ, Kane JJ, Jerry J, Blackwell C, Ponce de Leon FA, Robl JM. Cloned transgenic calves produced from nonquiescent fetal fibroblasts. Science, 280:1256-1258, 1998.
◦ Fulka Jr. J, First NL, Loi P, Moor RM. Cloning by somatic cell nuclear transfer. BioEssays, 20:847-851, 1998.
◦ McGrath J, Solter D. Nuclear transplantation in the mouse embryo by microsurgery and cell fusion. Science, 220:1300-1302, 1983.
◦ Wakayama T, Perry ACF, Zuccotti M, Johnson KR, Yanagimachi R. Full-term development of mice from enucleated oocytes injected with cumulus cell nuclei. Nature, 394:369-373, 1998.
◦ Wells DN, Misica PM, McMillan WH, Tervit HR. Production of cloned bovine fetuses following nuclear transfer using cells from a fetal fibroblast cell line. Theriogenology, 49:330 abst., 1998
◦ Willadsen SM. Nuclear transplantation in sheep embryos. Nature, 320:63-65, 1986.
◦ Wilmut I, Schnieke AE, McWhir J, Kind AJ, Campbell KHS. Viable dffspring derived from fetal and adult mammalian cells. Nature, 385:810-813, 1997.