회분식 미생물의 배양

이론 수많은 미생물들이 동정되고 특성이 밝혀지면서 여러 생화학적인 연구에 있어서 미생물은 중요한 실험재료로 사용되어져 왔고, 최근에는 동물 및 식물세포의 배양이 간편하게 됨에 따라 많은 생화학적인 연구에 배양된 세포가 사용되고 있다. 배양된 세포를 이용하여 성공적인 연구 결과를 얻기 위해서는 기본적으로 오염원들을 효과적으로 제거하는 방법 및 세포의 성장에 대한 기초적인 지식이 필요하다. 2.1. 멸균방법 멸균이란 대상 물체에 존재하는 모든 생명체들을 완전히 죽이는 조작을 말한다. 성공적인 세포배양을 위해서는 배양 전에 사용되는 모든 기구, 초자 및 배지에 존재하는 오염원들을 완전히 제거하여야 하는데 일반적으로 실험실에서 가장 흔하게 문제가 되는 오염원은 미생물이다. 따라서 현재까지 개발된 멸균법들은 모두 대상물체에 존재하는 미생물들을 완전히 제거하는데 기초를 두고 있으며, 실험실에서 많이 사용되는 방법들을 요약하면 다음과 같다. 2.1.1. 화염멸균(Sterilization by open fire) 미생물의 접종(inoculation) 및 도말(spreading)할 때 사용되는 백금 loop와 유리 도말기 또는 시험관이나 플라스크의 입 언저리와 같이 불꽃에 직접 접촉하여 물건에 묻어 있는 미생물들을 불꽃으로 태워서 죽이는 방법을 화염멸균이라 한다. 2.1.2. 건열멸균(Sterilization by dry heat) 주로 유리기구 등과 같이 고온에 안전한 물체를 멸균할 때 사용하는 방법으로, 대상물체를 오븐(oven)에 넣고, 170℃에서 90분간 넣어 둠으로써 이루어진다. 2.1.3. 습열멸균(Sterilization by moist heat) 습열멸균은 주로 배양배지 같은 용액들을 멸균하는데 사용되며 보통 고압증기 멸균기(autoclave)를 사용하여 이루어진다. 고압증기 멸균기는 대상 용액을 밀폐된 상태에서 1kg/cm2(15lb/in2)의 증기압에서 (120℃)에서 20분 이상