[자연과학] 생물학 실험 - 크로마토 그래피를 이용한 잎의 색소분리 실험

실험제목 : 크로마토 그래피를 이용한 잎의 색소분리 실험
`서론`
식물은 태양에너지와 몇가지 간단한 무기화합물을 이용해 세포내에 있는 엽록체에서 ATP와 산소를 만들어 내는데 이것을 광합성이라고 한다.
광합성의 종류에는 광화학적 광합성(명반응), 효소반응(암반응) 으로 나눌 수 있다. 여기서 명반응은 엽록체의 그라나(틸라코이드 막)에서 일어나는 반응이며 태양 에너지가 있을때 NADPH2와 ATP를 만들어 낸다. 암반응은 명반응의 산물인 NADPH2와 ATP를 이용하여 엽록체의 기질인 스트로마에서 CO2를 이용해서 포도당을 만드는 화학반응으로 칼빈회로라고도 한다.
명반응이 일어날 때 태양에너지를 받는 것은 엽록체의 그라나 틸라코이드 막에 있는 엽록소다. 엽록소의 종류는 여러 가지가 있다.
엽록소 a (청록색) - 광합성을 하는 모든 식물
엽록소 b (황록색) - 녹조류, 육상식물
엽록소 c - 갈조류
엽록소 d - 홍조류
이중에서 a와 b가 가장 일반적이며, 고등 식물에게서는 a:b가 보통 3:1의 비율로 존재한다. 식물은 일반적으로 엽록소 a, b 그리고 카르티노이드를 가진다.
그리고 엽록…(생략)

1. 일정량의 시금치 잎을 아세톤(엽록소는 물에는 녹지 않지만, 아세톤이나 에테르와 같은 유기용매에는 잘 녹는다. 10ml를 넣고 (Hood 안에서) 막자사발로 곱게 간다.

2. 여과지를 세로 12㎝와 가로 1.5㎝ 크기로 자른다. 전개용매와 종이와 만나는 곳에서 1cm~1.5cm 떨어진 곳에 연필로 표시하고 전개용매를 전개시킬 만큼도 연필로 표지한다. 이때 여과지를 손으로 만지지 않도록 한다.

3. 모세관을 사용하여 준비된 엽록소 추출액을 연필로 그은 선 중앙에 점적한다. 이때 점적된 부분이 가능한 원이 되도록 한다. 완전히 말린 후 입으로 호호 불어 말리고 이 과정을 4-5회 정도 반복하여 점적한다. (색소 농축 효과)

4. 여과지를 클립을 점적한 내용물과 전개용매가 닿지 않을 만큼을 측정해서 찝고 여과지가 시험관 벽면에 닿지 않도록 주의하고 전개용매에는 약 0.5cm 정도만 잠기도록 한다.

5. 전개용매가 여과지위에서 연필로 표시된 지점까지 오면 여과지를 꺼내서 완전히 말린다.

6. 전개된 색깔을 확인하고 전개된 정도를 측정해서 Rf 값을 구한다.