[자연과학] 생화학 실험 - 아미노산의 적정

아미노산의 적정
서론
아미노산은 약한 다양자성 산이다. 아미노산들은 관여하는 반응에 따라 산 또는 염기로 작용한다. 이는 아미노산의 α-C에 붙어있는 COO-, NH3+기, R group이 pH에 따라 각각 다른 형태로 존재하기 때문이다. 아미노산은 산으로 적정할 때 염기로 작용하고 염기로 적정할 때는 산으로 작용한다. 이번 실험에서는 HCL, NaOH 용액으로 주어진 아미노산 시료들을 적정해 얻어진 적정곡선을 분석하여 정체를 알아내는 것이다.
재료 및 연구방법
준비물 :
0.1M 히스티딘, 알라닌, 글루탐산 각각 200ml씩
(시약병 표면에는 아미노산 이름을 적지 말고 미지시료 A, B, C로 표기)
pH 미터기 많을수록 좋음
(조별로 있으면 가장 좋지만 최대한 많이 확보해야 실험이 빨리 끝남)
표준 완충용액, 0.1M NaOH, 0.1M HCl
vortexer, 50ml 뷰렛 8개와 스탠드 4개 set (스탠드 하나당 두 개씩 HCl, NaOH용)
작은 비이커 50ml 2개 (HCl, NaOH 뷰렛에 부을 때 사용)
비이커 250ml 16개 (조당 HCl, NaOH 중 한가지 적정만 선택해서 하면 8개로 가능)
폐액통, Kim wipes, 증류수

1. 시료 준비

1-2조 아미노산 A, 0.1M KHPO과 0.1M KHPO를 1:1로 혼합한 용액
3-4조 아미노산 A, 아미노산 B
5-6조 아미노산 B, 아미노산 C
7-8조 아미노산 C, 0.1M KHPO과 0.1M KHPO를 1:1로 혼합한 용액
각각 25ml씩 250ml용 비이커에 넣고 증류수 50ml를 첨가한 시료를 두 개씩 준비
(조당 HCl, NaOH 중 한가지 적정만 선택해서 하면 1개만 준비)

2. 시료가 들어있는 비이커 하나에 0.1M HCl or NaOH을 1ml 씩 첨가하면서 pH 변화를 측정

…

3. HCl 적정한 후 pH 변화와 NaOH로 적정한 후 pH 변화를 한 그래프에 나타내고 사용한 시료가 어떤 아미노산 이었는지를 측정