[자연과학][일반화학실험] HPCL을 이용한 아데인과 카페인 분리

1. Abstract　& Introduction

1) 실험목적

혼합물을 이룬 여러 가지 물질을 알아내고자 할때 사용하는 방법 중 하나인 크로마토그래피는 다양한 분야에서 활용되고 있는 도구다. 본 실험에서는 HPCL를 이용하여 아데닌, 카페인의 구조와 용리 시간과의 관계를 알아보고, 각 물질이 잘 흡수하는 파장대를 알아본다. 농도가 다른 카페인용액의 흡수 스펙트럼을 얻은 후 커피 한 잔에 포함된 카페인을 정량해본다.

2) 실험배경

가. 아데닌과 카페인의 극성
N
N
N
N
H
H2N
Adenine(C5H5O5)
N
CH3
N
N
O
O
CH3
CH3
Caffeine(C8H10O2N4)
아데닌은 상대적으로 극성이 강한 aimino기가 하나 있으며, caffeine은 극성이 약한methyl기를 3개 가지고 있다. 따라서 아데닌이 카페인보다 극성이 더 강하다고 할 수 있다.

나. 시료에 의해서 빛이 흡수되면 빛살의 복사세기는 감소한다. 복사 세기(irradiance, P)는 빛살의 단위 면적당, 초당 에너지를 의미한다. 빛은 단일 파장이 얻어지도록 단색화 장치를 통과한다. 길이가 b인 시료에 복사 세기가 P0인 단색 파장의 빛을 쪼여준다. 쪼아주는 반대편 쪽으로 시료를 통과되어 나온 빛살의 복사 세기는 P이다. 빛의 일부는 시료에 의해서 흡수될 것이므로, P`P0이다. 투광도 T는 원래의 쪼여준 빛과 시료를 통과한 빛의 분율로서 정의된다.

흡광도는 다음과 같이 정의된다 : A〓log〓-logT
빛이 전혀 흡수되지 않았을 때 P〓이며, A〓0이다. 때로는 흡광도를 광밀도라고도 한다.
흡광도는 시료 중에 함유되어 있는…
A〓bc

다.

1) 아데닌 300μM 카페인 500μM의 260nm 흡수 스펙트럼

2) 아데닌 300μM and 카페인 500μM혼합물의 파장대별 흡수 스펙트럼

3) 카페인 150μM, 300μM, 450μM용액과 커피의 270nm 흡수 스펙트럼