본문/내용
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생리학실습 - WBC Count
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실험목표
: 광학현미경과 Cover glass를 이용해 두가지 방법으로
1mm3당 백혈구개수를 측정한다.
준비물
: 혈액, 광학현미경, 희석액(튤크액),
혈액희석용 피펫(백혈구 피펫), 고무관,
Cover glass, Chamber(혈구계산판),
마이크로피펫
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White Blood Cell(WBC)란
-면역기능에 관여하는 혈액의 유핵세포
-수명 : 13~20일, 림프계(lymphatic system)에서 파괴되고 대변으로 배출
-검사의학
: 과립구(granulocyte) & 무과립구(agranulocyte)
: 과립구(다형핵백혈구)-호중구(neutrophil), 호산구(eosinophil), 호염구(basopil)
: 무과립구(단핵구)-림프구(lyphocyte), 단구(monocyte)
-임상적 의의
: 백혈구의 양은 질병의 진단보다는 경중의 판단에 유용, 백혈구 감별(differential count)이 질병의 원인검사로 유용
: 백혈구의 모든 세포들이 증가하는 경우에는 혈액의 농축에 의한 경우가 많음
-백혈구수(WBC count)
: 혈액 내에 존재하는 WBC수로 측정
: 자동혈구 분석기에서의 수치가 기준보다 낮거나 높은 경우 수시확인
-백혈구 감별계산(WBC differential count)
: 정상적인 말초혈액내의 백혈구는 서로 다른 종류의 세포들의 혼합
: 서로 다른 백혈구의 감별 계산을 얻고 이를 통하여 각각의 수치 파악
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실험방법-실험1(백혈구피펫이용)
혈액을 준비한다.
…
실험1 결과
실험2 결과
3 : 10개 4 : 52개
: 34.75 X 10 X 20 = 6,950개/mm3
이번 실험은 1mm3당 백혈구의 수를 구하는 WBC count였다. RBC의 수를 구하는 저번 실험과 비슷한 듯 하면서 어느 정도 차이점이 있었다. 처음 나타난 차이는 저번 실험에서는 희석액이 정말 희석만 한 데 비해서 이번 희석액은 Turk solution으로 빙초산 같은 희석액이었는데 적혈구를 용해시키고 백혈구의 핵을 염색시켜 자색을 띄게 하는 용액이었다. 우리가 지금 하는 실험은 자동혈구계산기가 없던 시절에 사용했던 방법으로 Chamber(혈구 계산판)를 통해 현미경상으로 보며 직접 백혈구의 수를 세는 방법이었다. 적혈구가 1mm3당 몇 백만개가 있는데 비해 백혈구는 6,000~17,000/mm3정도 밖에 있지 않아서 이번에는 희석을 20배로 하였다. 희석액인 Turk solution을 넣고 보면 ‘1’과 ‘11’칸 사이에 알맹이가 하나 들어있는데 이는 빠른 희석을 돕기 위한 알맹이이다. WBC count에서는 빨간색이었는데 WBC count에서는 하얀색이었다. 저번과 세는 방식도 약간 달랐는데 적혈구에 비해 수가 적어서 세기 수월했다. 백혈구 수를 셀 때는 400배로 확대해서 세는 것이 제일 수월했다. 마이크로피펫을 이용하여 실험할 때도 비슷했는데 혈액을 먼저 넣지않고 튤크액을 먼저 넣는 이유는 혈액응고를 방지하기 위해서였고 섞을때는 흔들어서 섞으면 안되고 손으로 탁탁치며 섞어줘야 했다. 우리조의 실험은 실험1에서는 6,950/mm3, 실험2에서는 6,850/mm3이 나옴으로 평균값이 나왔다.