1. DNA ligase
DNA º¹Á¦ ¹× ¼öº¹ ¶§ 2Áß ³ª¼± Áß ÇÑÂÊ »ç½½ÀÇ Àý´ÜºÎÀÎ 3`-ÇÏÀ̵å·Ï½Ã±â¿Í 5`-Àλê±â¸¦ Æ÷½ºÆ÷µð¿¡½ºÅ׸£ °áÇÕ½ÃÅ°´Â È¿¼Ò·Î ÁÖ·Î À¯ÀüÀÚ ÀçÁ¶ÇÕ °úÁ¤¿¡ »ç¿ëµÈ´Ù.
È¿¼Ò¹ÝÀÀ¿¡¼´Â Mg2+£«¸¦ ¿ä±¸Çϸç, ÆÄÁöÀÇ ¸®°¡¾ÆÁ¦´Â ATP¸¦, ¹ÚÅ׸®¾ÆÀÇ ¸®°¡¾ÆÁ¦´Â DPN(µðÆ÷½ºÆ÷ÇǸ®µò´ºÅ¬·¹¿ÀƼµå)À» ÇÊ¿ä·Î ÇÑ´Ù. ATP¿Í DPNÀº ¾Æµ¥´Ñ»ê°ú È¿¼Òº¹ÇÕü Çü¼º¿¡ ÀÌ¿ëµÈ´Ù. º¹ÇÕüÀÇ ÇÕ¼ºÀÌ Á¦1´Ü°è ¹ÝÀÀÀ̸ç, Á¦2´Ü°è¿¡¼´Â ÀÌ º¹ÇÕü¿Í DNA°¡ ¹ÝÀÀÇÏ¿© DNA¿¡ Æ÷½ºÆ÷µð¿¡½ºÅ׸£ °áÇÕÀ» Çü¼ºÇØ AMP¸¦ ¹æÃâÇÑ´Ù. È¿¼Ò£«DPN(ATP)¡©78È¿¼ÒAMP£«NMN(PPi) È¿¼ÒAMP£«DNA¡©78DNA(¿¬°á)£«È¿¼Ò£«AMP ÀÌ È¿¼Ò´Â µ¿¹°¼¼Æ÷¿¡¼µµ ¹ß°ßµÇ¸ç, »ýü ³»¿¡¼´Â DNAº¹Á¦, DNA¼öº¹¿¡ °ü¿©ÇÏ°í ÀÖ´Ù.
ÇöÀç ¸¹ÀÌ »ç¿ëµÇ´Â ligase´Â T4 DNA ligase¿Í E.coli DNA ligaseÀÌ´Ù. T4 DNA ligase´Â cofactor·Î ATP¸¦ ÇÊ¿ä·Î ÇÏ°í, E.coli ligase´Â NAD+¸¦ ÇÊ¿ä·Î ÇÑ´Ù. ÀÌµé µÎ ligase´Â blunt-ended DNA, cohesive-ended DNA, nicked DNAµî¿¡ ¸ðµÎ ÀÛ¿ëÇÒ ¼ö ÀÖÀ¸³ª E.coli DNA ligase´Â T4 DNA ligase¿Í ºñ±³ÇÒ ¶§ blunt-ended DNA¿¡ ÀÛ¿ëÇÏ´Â ÈûÀÌ ¾àÇϹǷΠÀϹÝÀûÀÎ À¯ÀüÀÚ À硦(»ý·«)
7.2 ~ 7.8
1) Á¦ÇÑÈ¿¼Ò(restriction enzyme)
|