[자연과학]생화학 - pH에 따른 Lipase의 분해도 측정

1. 실험제목 : pH에 따른 Lipase의 분해도 측정 2. 실험목적 효소인 Lipase는 pH, 온도등에 요인에 따라 활성도의 차이가 있다. 그중 pH에 따른 Lipase의 활성도를 측정하고, 그중 가장 optimal한 pH를 알아본다. 3. 기구 및 시약 - 기구 : 마이크로피펫, PCR-tube, spectrophotometer, cuvette, incubator, 원심분리기 - 시약 : Phosphate buffer (pH6, 7, 8), Lipase bead 3개, P-Nitrophenol butyrate(P-NPB) 4. 실험 방법 buffer P-NPB Lipase bead pH6 9500μl 300μl 1ea pH7 9500μl 300μl 1ea pH8 9500μl 300μl 1ea 1) Phosphate buffer의 pH에 따라 Phosphate buffer 9500μl, p-NPB 300μl, Lipase bead 1ea를 넣어 3개의 sample을 만든다. 2) 위의 3개의 sample을 incubator 25°C에서 반응시킨다. 3) 각각의 sample을 10분, 20분, 30분, 40분 에 500μl씩 취한 후 각각의 pH에 맞는 phosphate buffer 500μl씩 넣어 총 12개의 1ml의 sample을 만든다. 4) pH에 따라 sample의 OD값을 측정하고 그래프를 그린다. 5. 실험 결과 pH6 pH7 pH8 10분 0.014 0.210 0.604 20분 0.024 0.229 0.652 30분 0.021 0.241 0.678 40분 0.024 0.264 0.713 6. 고찰 이번 실험에서는 지난번 실험과는 달리 Lipase solution형태로 넣은게 아니라 Lipase bead를 넣어 측정할때의 효소의 영향을 줄여 잔여효…
이번 실험에서는 지난번 실험과는 달…