생물학 및 실험

_SLIDE_1_

Protein concentration determination
_SLIDE_2_
단백질정량이란
시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정
_SLIDE_3_
언제 단백질 정량을 하는가
wild type cell과 mutant cell 사이의 특정 protein양 발현에 차이 여부를 western blot을 이용해서 확인하고 싶을 경우
→ total protein 양을 단백질 정량을 이용해서 맞춰준다.
why
→ total protein양이 동일해야, 특정 protein 양의 상대적인 값을 비교할 수 있기 때문이다.

2) enzyme activity를 측정할 경우(enzyme-catalyzed reaction)
→ enzyme을 substrate에 처리한 후, 단위 시간당 substrate의 농도 감소를 통하여, enzyme activity를 측정한다.


_SLIDE_4_
단백질의 구조
_SLIDE_5_
단백질 정량 방법
UV spectrophotometry

Biuret method

BCA method

Lowry method

Bradford method
_SLIDE_6_
UV spectrophotometry
방향족 아미노산인 phe, tyr, trp에 의한 280 nm
에서 최대 흡광을 이용한 방법.
-50 ug - 1 mg/ml 범위의 단백질양의 측정이 가능
-빠르고 단백질 변성이…