[의학,약학] [분자생물학] DNA 염기서열 분석방법

분자생물학자들이 수행하는 가장 중요한 기술은 DNA 조각을 정확히 염기 배열하는 DNA 염기서열 결정법일 것이다. DNA 염기서열 결정법은 30여 년간 발전 및 이용되어왔으나, 1970년대 후반에 들어서야 빠르고 효과적인 염기서열 결정이 가능케 되었다.
그 중 대표적인 방법이 영국의 F. Sanger가 개발한 사슬 종결법(chain termination method)이다. Sanger method는 고전적인 염기 서열 분석 방법으로 약 30여년간 Sanger method는 DNA염기서열 결정 방법의 표준이 되어 왔다.
이 기술은 DNA 합성 기작에 그 기초를 둔다. 서열을 분석할 DNA의 단일가닥 부위가 주형(template)으로 사용되며 dideoxyNTP를 이용하여 chain을 termination시켜 DNA 사슬의 연장을 특이적으로 종료시키는 기술이다.
`고전` 이라고는 하나 여전히 정확도나 Read Length 면에서 Sequencing의 Gold Standard 로 통하며, Genomics 쪽에서의 활용도는 아무래도 줄어들겠지만 일반적인 연구용의 Sequencing 방법으로써는 여전히 건재하다.
하지만 Sanger method는 Human Genome Project와 같은 광범위한 염기서열 분석에 사용하기에는 극복하기 어려운 시간 및 비용의 한계…(생략)