[의학,약학] [생물학실험] 혈액 - 혈구 관찰과 혈액형 분석

수의예과
실험 날짜
실험 제목
혈구 관찰과 혈액형 분석
실험 목적
사람의 혈액 중 혈구를 구성하는 세포를 현미경을 통해 관찰하고 그 기능에 대하여 조사하며, 혈액형 판정방법과 원리를 이해한다.
준비물
광학현미경, 오토란셋, 1회용란셋알(반드시 개별 사용), 슬라이드글라스, 커버글라스, 이쑤시개, 70% 소독용 알코올, 표준 혈청(항A혈청, 항B혈청, 항D혈청(Rh측정용)), 탈지면, 김자염색액(또는 메틸렌블루), wright 염색약, 비이커, 킴스타올, 킴와이프스, 증류수 등
실험 원리 및 실험 방법
[실험 원리]
동물은 순환 기관을 이용하여 세포가 필요로 하는 물질이나 세포의 대사 노폐물 등을 운반한다. 혈액은 이와 같은 기능을 담당하는 물질로 세포 성분인 혈구와 액체 성분인 혈장으로 이루어져 있다.
혈구에는 산소나 이산화탄소를 운반하는 무핵의 적혈구와 식균 작용으로 우리 몸을 방어하는 핵을 가진 부정형의 백혈구 혈액 응고에 관여하는 작고 부정형의 무핵인 혈소판이 있다.
-백혈구의 종류
중성 백혈구 : 순환하고 있는 백혈구의 대부분을 차지하고 있으며, 식세포 작용에서 중요한 역할을 하는데, 특히 감염된 부위에 모여들어 침입하는 미생물을 삼키는 일을 한다. 염색시에 핑그빛 과립과 청색의 핵을 가진다.
산성 백혈구: 염증반응에 관여하고, 염증 반응 외에도 큰 기생 생물을 파괴하는 기능을 한다. 염색시 붉은 색 과립과 푸른색의 핵을 가진다.
염기성 백혈구 : 산성 백혈구와 마찬가지로 염증 반응에 관여하며, 히스타민이나 헤파린을 생성하는 것으로 알려져 있다. 염색시 검푸른 빛의 과립과 짙은 청색의 핵을 가진다.
림프구 : 면역계의 중추로서 림프 조직에서 침입자와 싸운다. 크기가 작으며 핵의 대부분은 청색으로 염색된다.
단핵 백혈구 : 감염 부…

1. 혈액 체취

(1)소독용 알코올로 새끼손가락을 잘 닦아준 후 일회용 란셋을 이용하여 혈액을 체취한다.

(2)준비된 1개이 슬라이드 글라스 세 개에 혈액을 적당량 떨어뜨린다.

2. 혈구 관찰

(1)슬라이드 글라스에 혈액 한 방울을 떨어뜨린 후 커버 글라스를 이용하여 도말시킨다.(도말이 잘 이루어지지 않으면 혈구들이 겹쳐져 보인다.) 2개 준비

(2)혈액이 완전히 말도록 방치한다.

(3)Wright나 김자용액 2-3방울을 가하여 5분간 염색시킨다.

(4)그 위에 phosphate buffer를 스라이드에 염색약이 넘치지 않게 1-2방울 떨어뜨린 후 3분간 둔다.

(5)증류수로 잉여의 염색약을 씻어낸다.

(6)커버 글라스를 덮고 현미경으로 관찰한다.(X400)

3. 혈액형 분석

(1)슬라이드 글라스 한 개에 항혈청A, 항혈청B, 항혈청D를 순서대로 한 방울 씩 떨어뜨린다.

(2)혈액을 혈청 아래 부분에 조금씩 떨어뜨린 후 이쑤시개로 잘 섞어준다. 이 때 혈액이 너무 많으면 응집 반응이 불안정하여 정확한 결과를 얻기 힘들어진다. 이쑤시개는 혈청 종류당 한 개씩 사용하여 섞어준다.

(3)정확한 응집은 약 1분 이내에 일어나며 육안으로 응집 유무를 판독한다.(판정시간은 3-5분을 초과하지 않도록 한다.) 슬라이드 글라스를 가온하거나 냉각시키면 판정용 혈청이 농축되어 거짓반응이 나타날 수 도 있다.(실온에서) 판정용 혈청의 보존 상태가 좋지 않거나 혈구가 과량일 때 가응집 현상이 나타날 수 있다.