¸ñÂ÷/Â÷·Ê
1. ½ÇÇè¸ñÀû : ¹ÚÅ׸®¾ÆÀÇ À¯ÀüÇüÁúÀ» Çö󽺹̵带 ÀÌ¿ëÇÏ¿© ÇüÁúÀüȯ ½Ã۰í ÇüÁúÀüȯ µÈ ¹ÚÅ׸®¾Æ¸¦ ¼±ÅÃÇÏ´Â °úÁ¤À» ÀÌÇØÇÑ´Ù.
2. ½ÇÇè¿ø¸® : ¿ÜºÎ·ÎºÎÅÍ ÁÖ¾îÁø DNA¸¦ ¹Þ¾Æµé¿© »ý¹°Ã¼ÀÇ À¯ÀüÀûÀÎ ¼ºÁúÀÌ º¯ÇÏ´Â °ÍÀ» ÇüÁúÀüȯ(Transformation)À̶ó ÇÑ´Ù. ´ëÀå±ÕÀ» Æ÷ÇÔÇØ¼ ´ëºÎºÐÀÇ ¹ÚÅ׸®¾Æ´Â ÀϹÝÀûÀÎ Á¶°Ç¿¡¼ Á¦ÇÑµÈ ¾çÀÇ DNA¸¸À» µµÀÔÇÑ´Ù. È¿°úÀûÀ¸·Î ÇüÁúÀüȯÇϱâ À§ÇÏ¿© DNA µµÀÔ´É·ÂÀ» °ÈÇÏ´Â ¹°¸®ÀûÀ̰ųª ÈÇÐÀûÀΠ󸮸¦ °ÅÃľ߸¸ ÇÑ´Ù. ÀÌ·¯ÇÑ Ã³¸®¸¦ ¹ÞÀº ¼¼Æ÷¸¦ ¡°competent cell¡± À̶ó°í ÇÑ´Ù. ´ëÀå±ÕÀÇ ÇüÁúÀüȯ½Ã ÇüÁúÀüȯµÈ ¼¼Æ÷¸¦ °¡·Á³»±â À§ÇÏ¿© Ç×»ýÁ¦ ÀúÇ×¼º À¯ÀüÀÚ¸¦ °¡Áö°í ÀÖ´Â Çö󽺹̵å (plasmid)¸¦ »ç¿ëÇÑ´Ù. ÇüÁúÀüȯ ÈÄ Ç×»ýÁ¦°¡ Æ÷ÇÔµÈ ¹èÁö¿¡ ÇüÁúÀüȯ ¼¼Æ÷¸¦ Ű¿ì¸é À̶§, Ç×»ýÁ¦ ÀúÇ×¼º Çö󽺹̵带 °¡Áö°í ÀÖ´Â ÇüÁúÀüȯü ¸¸ÀÌ Ç×»ýÁ¦ ÀúÇ×¼º À¯ÀüÀÚ¸¦ ¹ßÇö½ÃÅ´À¸·Î¼ Ç×»ýÁ¦°¡ Æ÷ÇÔµÈ ¹èÁö¿¡¼ ÀÚ¶ö ¼ö ÀÖ´Ù.
3. ½ÇÇèÀç·á : ¸¶ÀÌ...
º»¹®/³»¿ë
1. ½ÇÇè¸ñÀû : ¹ÚÅ׸®¾ÆÀÇ À¯ÀüÇüÁúÀ» Çö󽺹̵带 ÀÌ¿ëÇÏ¿© ÇüÁúÀüȯ ½Ã۰í ÇüÁúÀüȯ µÈ ¹ÚÅ׸®¾Æ¸¦ ¼±ÅÃÇÏ´Â °úÁ¤À» ÀÌÇØÇÑ´Ù.
2. ½ÇÇè¿ø¸® : ¿ÜºÎ·ÎºÎÅÍ ÁÖ¾îÁø DNA¸¦ ¹Þ¾Æµé¿© »ý¹°Ã¼ÀÇ À¯ÀüÀûÀÎ ¼ºÁúÀÌ º¯ÇÏ´Â °ÍÀ» ÇüÁúÀüȯ(Transformation)À̶ó ÇÑ´Ù. ´ëÀå±ÕÀ» Æ÷ÇÔÇØ¼ ´ëºÎºÐÀÇ ¹ÚÅ׸®¾Æ´Â ÀϹÝÀûÀÎ Á¶°Ç¿¡¼ Á¦ÇÑµÈ ¾çÀÇ DNA¸¸À» µµÀÔÇÑ´Ù. È¿°úÀûÀ¸·Î ÇüÁúÀüȯÇϱâ À§ÇÏ¿© DNA µµÀÔ´É·ÂÀ» °ÈÇÏ´Â ¹°¸®ÀûÀ̰ųª ÈÇÐÀûÀΠ󸮸¦ °ÅÃľ߸¸ ÇÑ´Ù. ÀÌ·¯ÇÑ Ã³¸®¸¦ ¹ÞÀº ¼¼Æ÷¸¦ ¡°competent cell¡± À̶ó°í ÇÑ´Ù. ´ëÀå±ÕÀÇ ÇüÁúÀüȯ½Ã ÇüÁúÀüȯµÈ ¼¼Æ÷¸¦ °¡·Á³»±â À§ÇÏ¿© Ç×»ýÁ¦ ÀúÇ×¼º À¯ÀüÀÚ¸¦ °¡Áö°í ÀÖ´Â Çö󽺹̵å (plasmid)¸¦ »ç¿ëÇÑ´Ù. ÇüÁúÀüȯ ÈÄ Ç×»ýÁ¦°¡ Æ÷ÇÔµÈ ¹èÁö¿¡ ÇüÁúÀüȯ ¼¼Æ÷¸¦ Ű¿ì¸é À̶§, Ç×»ýÁ¦ ÀúÇ×¼º Çö󽺹̵带 °¡Áö°í ÀÖ´Â ÇüÁúÀüȯü ¸¸ÀÌ Ç×»ýÁ¦ ÀúÇ×¼º À¯ÀüÀÚ¸¦ ¹ßÇö½ÃÅ´À¸·Î¼ Ç×»ýÁ¦°¡ Æ÷ÇÔµÈ ¹èÁö¿¡¼ ÀÚ¶ö ¼ö ÀÖ´Ù.
3. ½ÇÇèÀç·á : ¸¶ÀÌÅ©·Î ÇÇÆê, Çö󽺹̵å, ÆäÆ®¸®Á¢½Ã, spreader, competent cell, ice, water bath, LB¹èÁö, ¹è¾ç±â, Ç×»ýÁ¦, E-tube, ¾ËÄڿ÷¥ÇÁ
<¸¶ÀÌÅ©·Î ÇÇÆê>
¾×üÀÇ ÀÏÁ¤·®À» °¡Çϰųª ²¨³»¡¦(»ý·«)
ock¸¦ ²À ÇØÁÖ¾î¾ß Çϴµ¥ ±× ÀÌÀ¯´Â ÀÌ·¸°Ô ÇØÁÖ¾î¾ß ¼¼Æ÷°¡ Èå¹°Èå¹°ÇØÁ®¼ DNA°¡ ¼¼Æ÷º® ¾ÈÂÊÀ¸·Î µé¾î°¡±â ¿ëÀÌÇϱ⠶§¹®ÀÌ´Ù. ±×·¯³ª ³Ê¹« ¿À·¡ÇÏ¸é ¼¼Æ÷º®ÀÌ ÆÄ¿µÉ °¡´É¼ºÀÌ Àֱ⠶§¹®¿¡ 1ºÐÁ¤µµ°¡ Àû´çÇÏ´Ù. ±× ÈÄ LB¹èÁö¸¦ ³Ö°í 1½Ã°£ Á¤µµ Ű¿ö¾ßÇϴµ¥, ÀÌ °úÁ¤ ¿ª½Ã ½Ã°£°ü°è»ó 20ºÐÁ¤µµ·Î ´ÜÃàÇÏ¿´´Ù. ¸¶Áö¸·À¸·Î LB¹èÁö¿¡ ÁغñÇÑ ±ÕÀ» ³Ð°Ô Æñ´Âµ¥, À̶§¿¡´Â ³²´Â ±ÕÀÌ ¾øÀ» ¶§±îÁö Àß Æì¾ßÇÑ´Ù. ±×·±µ¥ ¿©±â¼ ±ÕÀ» ³Ð°Ô Æì´Âµ¥ »ç¿ëµÇ´Â ½ºÇÁ·¹´õ´Â »ç¿ëÇϱâ Àü ¾ËÄڿ÷¥ÇÁ¸¦ ÅëÇØ ´Þ±Å¾ß ÇÑ´Ù. ±× ÀÌÀ¯´Â ¿À» °¡ÇÔÀ¸·Î½á ¿ø·¡ ÀÖ¾úÀ»Áöµµ ¸ð¸£´Â ±ÕÀ» Á¦°ÅÇϱâ À§ÇÔÀÌ´Ù. Áï, »ì±ÕÀÇ È¿°ú¸¦ ³ë¸° °ÍÀÌ´Ù.
½ÇÇè °á°ú¸¦ º¸¸é AÇ×»ýÁ¦°¡ ÀÖ´Â LB¹èÁö¿¡¼ ÇüÁúÀüȯÀÌ ÀϾÀ½À» ¾Ë ¼ö Àִµ¥, ±× ÀÌÀ¯´Â AÇ×»ýÁ¦°¡ Åõ¿©µÈ LB¹èÁö¿¡ Ç×»ýÁ¦ ÀúÇ×¼º Çö󽺹̵带 °¡Áö°í ÀÖ´Â ÇüÁúÀüȯü°¡ Ç×»ýÁ¦ ÀúÇ×¼º À¯ÀüÀÚ¸¦ ¹ßÇö½ÃÄױ⠶§¹®ÀÌ´Ù.
7. Âü°í¹®Çå
-°ÀÇ pptÀÚ·á
-³×À̹ö ¹é°ú»çÀü(¸¶ÀÌÅ©·Î ÇÇÆê, Çö󽺹̵å, competent cell, Ç×»ýÁ¦)