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악골과 경조직 칼슘, 인 적정

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본문/내용
악골과 경조직(Calcium Phosphate Lab)
Determination of Calcium & Inorganic Phosphate content in Blood Plasma and Bone

Ⅰ. Introduction

칼슘과 인은 체내에 가장 많이 존재하는 무기질 중 하나이며 이들은 여러 가지 중요한 역할을 수행한다. 혈중 농도를 일정하게 유지하는 것은 매우 중요한 일 중 하나이며 우리 몸에는 이를 조절하기 위한 여러 기전들이 서로 맞물려 있고, 칼슘과 인이 부족할 경우 이를 보충하는 가장 주된 수단은 뼈로부터의 보충이다. 골의 무기 성분 함량은 약 65%(wt%)이며, 결정학적으로 수산화인회석[Ca10(PO4)6(OH)2]을 기본으로 하는 구조이며, 인체내 칼슘과 인의 99%와 85%를 함유하고 있다.
혈장 칼슘농도는 8.8~10.4mg%(2.2~2.6mM)의 범위 내에서 엄격하게 유지된다. 혈장 칼슘은 여러 형태로 존재하는데, 생리학적으로 활성형인 이온형태의 칼슘은 약 5mg으로 전체 칼슘의 약 50%를 차지하며, 약 4mg의 칼슘은 혈장단백질인 albumin(3mg) 또는 globulin(1mg)과 결합한 형태로 존재하는데 이 칼슘은 확산될 수 없는 칼슘이다. 또한 약 1mg의 칼슘은 작은 음이온과 복합체를 이루어 존재하는데 이들은 이온형태의 칼슘과 더불어 확산될 수 있는 칼슘이다.
정상 성인의 혈장에는 총 12~14mg의 인이 함유되어 있는데 이중 3-4mg는 무기인산형태로, 0.5mg는 phosphate ester 형태로, 5~10mg는 인지질 형태로 존재한다. 칼슘과 달리 혈장 내에 존재하는 인의 약 85%가 사구체를 통해 확산됨으로써 빠져나갈 수 있다. 혈장 내 무기인산의 대부분은 orthophosphate 형태로 존재하는데, HPO42-와 H2PO4-가 약 4:1의 비율로 존재하여 대부분이 2가 이온 형태로 존재함을 알 수 있다.

Ⅱ. 관련 이론


Ⅲ. Materials & Methods

① Introduce into a centrifuge tube 1ml of sample, 3ml of D.D.W and 1ml of 4% ammonium oxalate solution.

② Mix thoroughly & Stand for 30 min or longer & Mix the contents again.

③ Centrifuge for 5 min at 1500 rpm & Pour off the supernatant carefully.

④ Wash with 4ml of 0.5% ammonium hydroxide soln.

⑤ Centrifuge for 5 mi at 1500 rpm & Pour off the supernatant carefully.

⑥ Add 2ml of 1N sulfuric acid & Mix thoroughly.

⑦ Place the tube in a boiling water for 1 min.

⑧ Titrate with 0.01N KMnO4 to a definite pink color which persists for 30s at least.

① Introduce 1ml of sample or blank solution into tubes.

② Add 0.5ml of 5N sulfuric acid.

③ Add 1ml of acid molybdate reagent.

④ Mix thoroughly & Add 0.1ml reducing agent(ANSA)

⑤ Add 2.4 ml of D.D.W. & Mix well.

⑥ Read absorbance at 660nm after 10 min.




📝 Regist Info
I D : leew*****
Date : 2012-05-11
FileNo : 11042399

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