Lowry, Kjeldahl 법을 이용한 단백질 정량

Title : Kjeldahl 법을 이용한 단백질 정량
< Introduction >
식품중의 단백질은 탄소, 수소, 산소의 각 원소 외에 반드시 일정량의 비율로 질소를 함유하고 있다. 특히 질소는 지방이나 탄수화물 등 식품의 다른 중요 성분에는 포함되어 있지 않으므로, 식품중의 단백질 정량은 전질소량을 정량하고 그 값에 일정의 계수를 곱하여 조단백질의 양을 구한다.
< Principle >
질소정량법으로는 여러 가지 방법이 있지만 1883년 Kjeldahl이 제안한 방법이 오늘날 널리 이용되고 있다. 이 방법의 원리는 다음과 같다. 즉 일정량의 시료에 진한 황산과 촉매를 가열하면 식품성분의 분해반응과 동시에 산화, 환원 반응이 발생하여 시료 중의 질소는 모두 암모니아로 되는데 이 암모니아는 반응액의 황산과 결합하여 황산암모늄의 형태로 분해액 중에 남는다. 이 황산암모늄은 식품의 다른 여러 가지 분해물과 같이 존재하기 때문에 황산암모늄을 구성하는 질소의 양을 정량하기가 어려우므로 이 질소만을 따로 분리하기 위하여 과잉의 알칼리를 가하고 가열하면 황산암모늄 중의 질소는 알칼리와 반응하여 암모니아 기체로 변하여 식품 중의 다른 분해물…(생략)

1) 분 해

2) 증 류

3) 중 화

4) 적 정

① 시료 0.5g을 유산지에 싸서 분해 flask 에 넣는다.

② 분해촉매제 10g을 막자사발로 잘게 간다.

③ boiling stone 4~5개와 분해촉매제를 분해 flask에 넣는다.

④ Hood에서 20ml 을 분해 flask에 첨가한다.

⑤ 400℃에서 2~3h 가열한다.

① 맑은 청색을 띠고 있는 분해 flask에 증류수 200ml를 희석한다.

② 삼각플라스크 2개를 준비하여 하나의 플라스크에는 분해액 20ml와 NaOH 30%용액 25ml를 넣고, 다른 플라스크에는 황산 25ml와 지시약 4~5방울 떨어뜨린다.

③