[자연과학] 이온교환 Chromatography에 의한 달걀 흰자 Lysozyme 분리

이온교환 Chromatography에 의한 달걀 흰자 Lysozyme 분리 1. 실험제목 : 이온교환 Chromatography에 의한 달걀 흰자 Lysozyme 분리 2. 실험일시 : 2009. 10. 8 3. 실험목적 : 세포에는 수많은 종류의 단백질이 함유되어 있으며, 이들의 아미노산 조성이나 배열을 결정하고 성질을 규명하기 위해서는 먼저 단백질을 추출해 내야 합니다. 이온교환 Chromatography를 비롯한 여러 정제법에 의해 순수한 단백질을 얻는 것은 단백질 연구의 가장 기본이며 필수적인 과정입니다. 4. 재료 및 기구 : (1) 기구 ① 달걀 ② 비커 ③ 거즈 ④ 피펫(10㎖, 200㎕) ⑤ Tube(5개) ⑥ 주사기(Chromatography Column) ⑦ 파라필름 ⑧ 유리솜 ⑨ 지지대 ⑩ 스탠드 (2)시약 ① Sephadex(CM-Sephadex C-25; Pharmacia) ② Tris-EDTA buffer 0.05M(0.05M tris , 0.004 EDTA, 0.05M , 8.2) ③ 탄산 buffer 0.2M(0.2M 800㎖, 0.2M , 10.5) 5. 실험이론 및 원리 ◆ 기본개념 ▷ Lysozyme Lysozyme은 세균의 세포벽을 이루고 있는 다당류의 구성성분인 N-acetylmuarmic acid(NAM)와 N-acetylglucosamine(NAG) 사이의 β-·1,4 연결을 가수분해하는 효소입니다. 이미 순수하게 분리되어 아미노산 서열이 결정되었으며 입체구조가 가장 먼저 알려진 단백질입니다. Lysozyme은 다른 단백질에 비해 등전점이 높으며 (pH 10.5) 분자량이 적은(14,300) 특징을 가지고 있습니다. 따라서 이러한 특징을 이온교환 크로마토그라피와 Sephadex 젤 여과에 이용할 수 있습니다. ▷ Ion-Exchange Chromatography 이온교환 현상을 이용하여 시료 속에서, 목적하는 성분을 분리…
이온교환 현상을 …