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○ Total Cholesterol 측정
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○ Total Cholesterol 측정
? 목 차
1. 실험제목 : Total Cholesterol 측정
2. 실험일자
3. 측정원리 및 의미
4. 기구 및 시약
5. 실험방법
6. 실험결과
7. 고찰
8. 참고문헌
1. 실험제목 : Total Cholesterol 측정
2. 실험일자 :
3. 측정원리 및 의미 : 혈청 중에는 유리형 및 에스터형의 콜레스테롤이 존재하며 에스터형에 Cholesterol ester hydrolase 효소를 반응 시키면 유리형과 지방산으로 분해하고 유리형에 Cholesterol 산화 효소를 반응시키면 H₂O₂와 4-?Cholesterol이 생성된다. 생성된 H₂O₂에 과산화 효소와 4- 아미노산티피린 및 phenol을 동시에 반응시키면 산화적 축합 반응으로 키논이 생성되며 이를 비색하여 콜레스테롤을 정량하는 법이다.
4. 기구 및 시약 : beaker, erlenmeyer, pipet, Micro pipet, 유리막대, Water bath (항온수조), 분광광도계, 효소시약, 완충액, 표준액
5. 실험방법
(1) 효소 용액 제조 : 비커에 효소시약 1병 (105ml 희석용)을 완충액 1병(105ml)에 잘 용해시킨 후 라벨링 한다. (효소시약 병에 완충액을 조금씩 넣어 가면서 용해시킨다.)
(2) 측정방법
1
2
3
4
5
정제수(ml)
0.02
0.01
0.005
-
표준액(ml)
0.01
0.015
0.02
피검혈청(ml)
-
-
0.02
효소용액(ml)
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
(3) 충분히 혼합하여 37℃ Water bath에서 5분간 가온한다.
(4) 맹검용을 대조로 하여 파장 505nm에서 흡광도를 측정한다.
6. 실험결과
농도 : …
…