항산화제(Antioxidants)

(1) 지질자동산화계에서의 항산화능
Linoleic acid 유지 혼탁액은 Osawa 등의 방법28)에 따라 제조하였다. linoleic acid 0.13㎖, 99.0% ethanol 10㎖, 50mM phosphate buffer(pH 7.0) 10㎖을 혼합하고, 각 약재 추출물을 농도별로 첨가한 다음, 증류수로 total volume이 25㎖이 되도록 조절하였다. 이 혼합액을 test tube에 넣고, 40℃ 배양기에서 배양하여 자동산화를 촉진시켰다.
TBA법에 의한 MDA 정량은 Ohkawa 등의 방법29)에 따라 실시하였다. 즉 40℃에서 배양시킨 linoleic acid 혼탁액 50㎕에 8.1% sodium dodecyl sulfate(SDS) 0.2㎖, 20% acetic acid(pH 3.5, 10N NaOH) 1.5㎖, 0.8% TBA 수용액 1.5 ㎖을 넣고, 증류수로 이 혼합액의 total volume을 4㎖로 조절한 다음, 5℃에서 60분간 방치하고, 다시 95℃에서 60분간 발색시킨 뒤, 흐르는 수돗물에서 냉각시켜 사용하여 532nm에서 흡광도를 측정하였다. 그리고 과산화지질의 함량은 MDA로 표준 검량곡선을 작성한 다음, 이에 의거한 측정치를 MDA μM로 표기하였다.