Elution

1.Introduction

이번 실험은 유전자 재조합 실험의 두 번째 단계에 해당한다. pGEM-core에서 f1 ori를 잘라서 pET-28(a)에 붙여야 한다. 그렇기 때문에 이번 실험에서는 pGEM-core를 제한효소를 이용해 자르고 전기영동을 통한 분리로 f1 ori를 얻는 것을 시행한다. 제한효소와 전기영동에 대한 것은 다음과 같다.

(1)제한효소

제한효소는 주로 세균이 갖고 있는 DNA를 자를 수 있는 효소(endonuclease)이다. 이는 세균이 외부 DNA(virus)를 제거하기 위한 수단으로 만드는 것이다. 세균 자신의 DNA는 methyl화시켜 보호되므로 피해를 입지 않는다.

(2)전기영동

대부분의 생물학적 거대분자들은 전기적으로 전하를 띠며 따라서 전기장에서 이동할 수 있다. 예를 들면 양전하를 띤 단백질용액이 들어 있는 수평관 양쪽에 전지의 끝을 연결하면 분자들은 관의 양전하 끝에서 음전하를 띤 끝으로 이동할 것이다. 이동방향은 전하의 부호에 따르지만 이동속도는 침강에서처럼 전하의 크기에 의존하며 분자의 형태(마찰저항)에 의해서도 영향을 받는다. 분자의 질량은 이동속도에 직접적으로 관여하지는 않지만 마찰계수에 영향을 주는…(생략)

(3)elution