탄수화물의 정성 및 정량분석

고전적인 당의 분석실험(Tollen`s, Benedict`s, Fehiling`s)은 당의 환원력을 바탕으로 한다. 그러나 그 양을 측정하는 것은 중력에 의해 측정된 침전량에 관계하므로 위의 방법으로 양을 측정하는 것에는 어려움이 있다.
당의 환원력에 기초한 비색측정방법은 시아니드3가철염(ferricyanide)을 시아니드2가철염(ferrocynide)으로 환원시키는 Park and Johnson의 방법과 Dygert 등에 의한 네오쿠프로인(neocuproine) 방법을 포함한다. 네오쿠프로인 방법은 알칼리 존재하에서 당의 산화가 이루어지는 동안 Cu++이 Cu+로 환원되는 것에 기초한다.
이 반응에서 환원된 구리이온은 네오쿠프로인(2,9-dimethyl-1,10-phenanthroline)과 착화합물을 이루게 된다. 이 방법은 비특이적으로 일어나게 되고, 다음 식에서와 같이 알도스나 케토스 모두가 정반응을 하게 된다.


붉은 빛을 띠는 Cu+-네오쿠프로인 착화합물은 수용성이고 460nm의 빛에서 최대의 흡광도를 나타내며 생성된 색조의 양은 산화된 당의 양과 비례관계를 이루며 분광기로 그 양을 측정할 수 있다. 이 방법의 농도의 범위는 0.02µ몰/ml에서 0.2µ몰/ml 사이에 있다.

3) 특이한 효소 작용 …(생략)