[자연과학] 일반화학실험 - 크로마토그래피 실험

1. 목적

크로마토그래피에 의한 지시약의 분리 및 직접 합성한 아스피린의 전개를 통하여 크로마토그래피의
원리를 배운다

2. 원리

(1) 분리 방법의 종류

침전, 여과, 확산, 원심 분리, 증류, 추출, 전기영동 등

(2) 크로마토그래피

혼합물의 각 성분을 분리하는 방법
정량이 가능
광물의 금속, 이온, 동식물의 생체 시료, 미량의 환경 시료 분석 등에 이용
분배 평형의 원리
- 용매A와 용매B를 혼합한 용액에 녹아있는 분자 M에 대하여 용매A와 용매B 사이에 분포한
M을 [M(A)M(B)] 와 같이 나타낸다.
- 분배계수 K는 두 용매 A,B 사이에서의 용질의 농도비이다.
- 혼합용질이 이동상(액체 또는 기체)에 섞여 고정상(고체)을 통과할 때, 각각의 용질은 서로 다
른 분배계수 K를 가진다.
분배계수가 다른 이유
- 용질 분자와 고정상을 이루는 물질 사이에 상호작용하는 힘이 다름
- 각각의 용질이 이동상에 대해 서로 다른 용해도를 가짐
(용해도가 큰 용질일수록 고정상에서의 이동속도가 빠르다)

(3) 이번 실험의 전개 방식

T…(생략)

3. 기구 및 시약

4. 방법

① TLC판을 두 개씩 준비

② 첫 번째 TLC판의 바닥에서 1cm정도 떨어진 곳에 연필로 점을 5개 나란히 찍음

③ TLC판에 준비된 4가지 시료 용액 및 혼합 미지시료를 각각 모세관에 묻힌 후 TLC판에 차례로

④ ③의 TLC판을 (CH2Cl2:MeOH〓5:1)의 전개용매로 전개한다. 이 때 시료의 점들이 전개용매에 잠

⑤ 전개액이 TLC판의 위쪽 끝에서 1cm정도 떨어진 곳까지 도달하면 TLC판을 꺼내어 연필로 용매

⑥ 위 실험으로 얻은 Rf값(반점이 이동한 거리/전개액이 이동한 거리)을 측정하여, 각 지시약에 대한

⑦ 재결정 전, 후의 아스피린 결정 및 살리실산을 각각 아주 소량 취하여 MeOH에 녹여 시료로 준

⑧ 두 번째 TLC판에 살리실산, 순수한 아스피린 및 합성 아스피린을 같은 방법으로 점을 찍고 말림

⑨ 이동상으로 전개용매 (Hx:EA〓1:4)를 사용

⑩ 전개된 TLC판에 UV램프(254mm)를 쪼여 나타나는 현상을 연필로 그림

⑪ 아스피린 TLC의 경우 합성한 아스피린과 출발물질인 살리실산의 Rf값을 비교하여 반응하지 않은

5. 실험데이터 및 결과