[자연과학] 생물학 실험 - 효소의 활성에 미치는 온도, pH, salt의 영향

생물학 실험 - 효소의 활성에 미치는 온도, pH, salt의 영향

1. ABSTRACT

1) 실험목표

본 실험에서는 α-amylase로 인한 starch의 가수분해 과정을 확인한다. α-amylase의 유무에 따라 starch의 분해도가 어떻게 달라지는지를 확인하도록 한다. 또, 어떤 온도, pH, 농도 조건에서 효소 α-amylase가 가장 잘 활성화되는지를 알아보는 실험을 해본다.

2) 실험이론

화학반응은 일반적으로 세포 안에서보다 훨씬 높은 온도에서, 세포 내 반응물의 농도가 낮은 상태에서 일어난다. 생물은 효소를 이용하여 이러한 문제들을 모면할 수 있다. 효소란 생물학적인 촉매로서, 화학반응을 빠르게 촉진시키는 특수화된 단밸질이다. 이 때 효소 자신은 변하지 않으면서 기질과 결합하여 복합체를 형성하고, 기질 분자의 구조를 변화시킨다. 기질이란 효소가 작용하는 물질이다.
효소의 의의는 체온 범위에서 반응이 빠르게 일어나게 한다는데 있다. 온도가 높아지면 반응물의 활성화에너지가 높아지지만 체온에서는 그렇게 할 수 없기 때문에 효소가 반응에 필요한 활성화에너지를 낮춰주는 방식으로 작용한다. 게다가 효소는 일종의…(생략)

2. MATERIALS & PROCEDURE

(1) 재료

(2) 방법

1) 6개의 시험관에 ①~⑥라고 표시를 했다.

2) 각 시험관에 2㎖의 1% starch 용액, TE buffer(pH 7.0) 1㎖,D.W(증류수)1㎖을 넣었다.

3) ①②번 시험관은 4℃(얼음), ③④번 시험관은 40℃(water bath),

⑤⑥번 시험관은 70℃(water bath)에서 5분간 incubation했다.

4) ②④⑥번 시험관에 각각 40㎕의 α-amylase(아밀라아제)을 가하여 잘 섞었고. 해당 온도에 10분간 놓아두었다.

5) 10분 후, 각 온도에서 enzyme이 들어가지 않은 시험관(대조군)과 비교하여 용액의 색이 어떻게 변화하였는지 관찰했다.

6) 20㎕의 요오드를 넣고, spectrophotometer(분광광도계)로 각 용액의 흡광도를 측정했다.