[의학] 조직의 포매

조직의 포매
? 포매의 의의
생체 또는 고정된 조직괴를 현미경으로 관찰하기 위하여 절편을 제작할시 특수한 매질(포매제)를 사용하여 조직에 침투시켜, 조직 전체를 일정한 형태로 경화시키고 동시에 조직내 공간을 채워 조직의 구조적 변형이 발생하지 않도록 하는 과정을 포매라 한다.
? 포매제의 종류와 사용용도
? 파라핀 - 일반표본제작.
? 셀로이딘 - 뇌, 안구, 뼈등의 표본제작.
? 카보왁스 - 위축, 경화가 심한 조직제작.
? 젤라틴 또는 OCT컴파운드 - 동결절편제작.
? 에폭시수지 - 소수성, 얇은 절편제작, 전자현미경 절편제작시.
? 메티크릴수지 - 친수성, 비탈회골조직, 조직화학반응 적용에 적합.
? 각종포매법
１. 파라핀포매
약 5?정도의 절편 관찰, 포매과정에서 사용되는 알코올과 자일렝￦s과 같은 유기용매에 의해 지질이 용해, 파란핀 침투시 고온(약60 ?C)에서 수행해야하므로 효소의 소실 그리고 조직의 경화와 수축을 피할수 없는 단점을 가진다. 물이나 알코올에 녹지 않기 때문에 포매하기 전에 반드시 탈수와 투명과정을 통과한후 파라핀을 침투 시켜야 한다…(생략)

1) 파라핀의 성질 -일반적인 목적으로는 융점이 56~58 ?C 범위인 경질 파라핀이 적당하다. 융점보다 10~20 ?C 정도 높은 온도에서 오래 가열하면 노란색을 띤 비누와 같은 경도를 지니게 되므로 장기간 고온에 두는 것을 피한다. 조직 염색시 색소침착 된다. 파라핀의 융점보다 2~3 ?C 높게조절하여 항온상태를 유지.

2) 파라핀 침투과정 - 포매 전 처리 과정으로 탈수, 투명, 침투의 3단계를 통과한후, 파라핀으로 포매를 수행한다.

3) 탈수 - 고정된 조직은 보통 수세하기 때문에 조직내에는 항상 물이 존재, 파라핀 침투전에 탈수가 필요하다. 일반적으로 에탄올(비등점 78.3 ?C)이사용. 저농도의 알코올에서 점진적으로 고농도의 알코올로 상승시키면서 진행한다 (70%?80%?90%?100%(I)?100%(II)). 탈수시 만일 점진적인 상승계열 알코올과정을 지키지 않고 저농도에서 건너 뛰어무수알코올 단계로옮기게 되면, 물과 알코올아 신속히 치환되는 과정에서 극심한 교류가 발생하여 조직편이 심하게 수축과 경화가 발생된다. 혈구가 풍부한 비장이나 림프조직 그리고 피부와 심근과 같은 조직에 심하게 발생, 박절과정에서 절편이 갈라지는 현상이 나타나게 된다. 탈수시 70%이하의 저농도 알코올에 조직편을 정해진 시간보다 오래두면 조직이 부풀어 해체경향을, 80%이상의 고농도에서 오래두면 지나치게 경화되어 부스러지는 경향을 나타낸다. 진행시간은 보통 1시간으로 하고, 뇌,배아,곤충등과 같은 연한조직이나 부피가 큰 조직은 30% 또는 50%부터 시작하는것이 더 효과적이다.

(1) 무수 알코올과 사용법

(2) 에탄올 이외의 탈수제

① 변성알코올: 에탄올에 소량 약 1%의 메탄을 첨가.

② 메탄올: 독성이 매우 강하다, 실명을 초래할 수 있다.

③ 이소프로필알코올: 전자렌지를 이용한 파라핀 침투기의 탈수제

④ 아세톤: 탈수작용은 빠르나 조직내로 침투가 좋지 않기 때문에 오래두면 조직이 부스러지기 쉬워진다.

⑤ 다이옥산: 탈수와 투명을 동시에 하는데 사용. 단점은 고가 유기용매로 매우 강한 독성과 인화성을 지니고 있어서 취급시 특별한 주의가 필요하다.

⑥ n-부틸알코올: 탈수와 동시에 투명과정을 수용할 수 있는 유기용매.

4) 투명-탈수제를 제거하는 과